Grip virüsünün sürüklenmesi. Antijenik yapı. İnfluenza A virüslerinin tipik Ag'leri hemaglutinin ve nöraminidazdır; İnfluenza virüslerinin sınıflandırılması bu proteinlerin kombinasyonuna dayanmaktadır. İnfluenza virüsünün moleküler genetiği
A tipi influenza virüslerinin tipik Ag'leri - ; İnfluenza virüslerinin sınıflandırılması bu proteinlerin kombinasyonuna dayanmaktadır. Özellikle influenza A virüsünden 13 Ag izole edilir çeşitli türler hemaglutinin ve 10 tip nöraminidaz. A, B ve C tipi virüsler arasındaki antijenik farklılıklar, NP ve M proteinlerinin yapılarındaki farklılıkları belirler. A tipi virüslerin tüm suşları grup (S-) Ag RTGA'da algılandı. Türe özgü Ag - hemaglutinin ve nöraminidaz; Yapılarındaki varyasyon, sıklıkla bir salgın salgının dinamiklerinde yeni serolojik varyantların ortaya çıkmasına neden olur (Şekil 1). 26 –2 ). Antijenik yapıdaki değişiklikler iki şekilde meydana gelebilir:
Y Düzeni, Şekil 26-02.
Pirinç. 26 –2 . Mekanizma diyagramı, influenza virüslerinin antijenik kaymasına ve antijenik sürüklenmesine neden olur. Metindeki açıklamalar.
Antijenik sürüklenme. Ag yapısında küçük değişikliklere neden olur nokta mutasyonlarından kaynaklanır. Hemaglutinin yapısı büyük ölçüde değişir. Salgın sürecinin dinamiğinde sürüklenme gelişir ve patojenin önceki dolaşımının bir sonucu olarak popülasyonda gelişen bağışıklık reaksiyonlarının özgüllüğünü azaltır.
Antijenik değişim. Virüsün yeni bir antijenik varyantının ortaya çıkmasına neden olur, önceden dolaşan varyantlarla ilgisiz veya antijenik olarak uzaktan ilişkili. Muhtemelen antijenik kayma, insan ve hayvan virüs türleri arasındaki genetik rekombinasyonun veya salgın yeteneklerini tüketmiş bir virüs popülasyonundaki gizli dolaşımın bir sonucu olarak meydana gelir. Her 10-20 yılda bir insan nüfusu yenileniyor ancak bağışıklık “katmanı” ortadan kayboluyor ve bu da pandemilerin oluşmasına yol açıyor.
R. G. WEBSTER ve W. G. LEIVER i(R.G. WEBSTER ve W.G. LAYER)
I.GİRİŞ
İnfluenza virüsü tip A1, kendi antijenik yapısını o kadar güçlü bir şekilde değiştirme kabiliyeti nedeniyle, insanlarda bulaşıcı hastalıklara neden olan ajanlar arasında benzersizdir; bir suşla enfeksiyona yanıt olarak kazanılan spesifik bağışıklık, bir sonraki ortaya çıkan virüse karşı çok az koruma sağlar veya hiç koruma sağlamaz. Bu nedenle virüsün değişkenliği nedeniyle grip, başlıca salgın insan hastalıklarından biri olmaya devam ediyor.
İnfluenza virüslerinde iki tip antijenik varyasyon bulunmuştur: antijenik sürüklenme (Burnet, 1955) ve önemli antijenik kayma. Antijenik sürüklenme, esas olarak belirli bir suş ailesi içinde meydana gelen nispeten küçük değişikliklerle karakterize edilir; bunların her biri, hem iç hem de yüzey antijenleriyle ilgili olarak bu ailenin tüm diğer suşlarıyla kolayca ilişkilendirilebilir. İnsanları enfekte eden influenza A virüsü suşları arasında, sonraki her varyant bir öncekinin yerini alır. Bunun nedeni muhtemelen yeni antijenik varyantların konakçının immünolojik engellerini aşmada sahip olduğu seçici avantajdır. Antijenik sürüklenme sadece A, IAO ve B'nin değil, influenza virüslerinin de karakteristiğidir.
Yalnızca A virüsü için açıklanan ikinci tip antijenik varyasyon, daha beklenmedik ve dramatik değişiklikler içerir. Bunlara önemli antijenik kaymalar2 denir. Bu değişimler 10-15 yıllık aralıklarla meydana gelir (bkz. Bölüm 15) ve popülasyonun bağışıklığı olmayan antijenik olarak "yeni" virüslerin ortaya çıkmasıyla işaretlenir ve bunlar tam olarak önemli grip salgınlarına neden olan "virüslerdir".
Bu "yeni" virüsler, yeni virüsün ortaya çıkmasından önce insanlar arasında dolaşanlardan tamamen farklı olan HA1 ve NA alt birimlerine sahiptir. Yüzey antijenlerinin birinde veya her ikisinde önemli bir değişim meydana gelebilir; Bu iki kategorinin her birine ait virüslerin neden olduğu iki grip salgını tanımlanmıştır (bkz. Bölüm 15).
Grip aynı zamanda bazı hayvan ve kuşların doğal bir enfeksiyonudur. Yalnızca A tipi olan virüsler domuzlardan, atlardan ve aralarında tavuk, ördek, hindi, bıldırcın, sülün ve sumruların da bulunduğu çeşitli kuşlardan izole edilmiştir (McQueen ve diğerleri, 1968; Pereira, 1969; Dünya Sağlık Örgütü, 1972). ). Daha önce, bir influenza virüsü partikülünün yüzeyinin, tüm suşların bir parçası olan bir antijen mozaiğinden oluştuğuna inanılıyordu. bu türden ve bu antijenik varyasyon, bu antijenlerin belirgin konumlardan girintili konumlara ve bunun tersi yönde hareketinden kaynaklanır. Daha sonra başka bir antijenik sürüklenme mekanizması önerildi. Halen HA ve NA alt birimlerinin antijenik belirleyicilerini oluşturan amino asitlerde sürekli olarak değişikliklerin meydana geldiğine inanılmaktadır. Bunlar, viral RNA'nın mutasyonunun neden olduğu, polieltit alt birimlerinin amino asit dizisinde değişiklikler sergileyen mutantların seçiminin sonucudur. "Yeni" virüslerin ortaya çıkmasına neden olan önemli antijenik kaymalar muhtemelen şunlardan kaynaklanmaktadır: farklı bir mekanizma. Bu "yeni" virüslerin hemaglutinasyon ve nöraminidaz alt birimleri, yeni türlerin ortaya çıkmasından önce insanlar arasında dolaşan virüslerin alt birimlerinden antijenik olarak tamamen farklıdır. "Yeni" virüsün, daha önceki bir insan influenza virüsünün mutasyonunun sonucu olmadığına, bir insan virüsü ile doğal konakçıları hayvanlar veya kuşlar olan influenza A virüsünün birçok türünden biri arasındaki genetik rekombinasyondan ortaya çıktığına inanıyoruz. Ortaya çıkan "yeni" virüs, insan popülasyonundan tamamen kaybolan "eski" virüsün yerini alıyor.
İnfluenza B virüslerinde önemli antijenik değişiklikler henüz tanımlanmamıştır. Pereira (1969), influenza B virüslerinde önemli antijenik değişikliklerin bulunmamasının, aşağı hayvanlar ve kuşlar arasında bu tür influenza virüslerinin bulunmamasının bir sonucu olabileceğini öne sürdü.
Antijenik varyasyon yalnızca HA ve NA alt birimlerini içerir; Virüsün iç proteinleri (nükleoirotein antijeni ve matris veya membran M proteini) büyük ölçüde sabittir. İki yüzey antijeni arasında HA daha önemlidir çünkü bu antijene karşı antikorlar virüsün enfektivitesini nötralize eder.
II. TARİHSEL BAKIMINDAN GRİP (ayrıca bkz. Bölüm 15)
A. ANTİJENİK DEĞİŞİKLİKLERİN KANITLARI
Grip benzeri hastalık geçtiğimiz yüzyıllarda sıklıkla rapor edilmiştir (Hirsch, 1883); hastalık ya nüfusun çok büyük bir bölümünü etkileyen ve neredeyse tüm dünyaya yayılan pandemiler şeklinde ya da yerel salgınlar şeklinde ortaya çıktı. İnfluenza virüsünün ilk kez (insanlardan. Ed.)1 izole edildiği 1933 yılına kadar, belirli bir pandemiye gerçekten bir grip virüsünün neden olup olmadığını kesin olarak söylemek imkansızdı. Ancak tarihi belgelerde anlatılan salgın hastalıkların özellikleri, bu salgınların pekala grip virüslerinden kaynaklanabileceğini gösteriyor. Diğer enfeksiyon hastalıklarının influenzaya özgü semptomları olmasına rağmen, sadece influenza birkaç hafta süren ve aniden ortadan kaybolan ani salgınlara neden olur (Burnet ve White, 1972).Yaşlı insanlar üzerinde yapılan serolojik çalışmalar aynı zamanda daha önce meydana gelen influenza salgınlarına da işaret etmektedir. uzak zamanlar (Mulder, Mazurel, 1958).
Bilinen en eski grip salgını 1170 yılında Almanya'da kaydedilmiştir (Hirsch, 1883) ve diğer tarihi kaynaklardan 1500'den bu yana Avrupa'daki salgınların oldukça eksiksiz bir listesini derlemek mümkündür. Burada yalnızca en şiddetli salgınlardan bahsedilecektir. Daha fazla ayrıntı Hirsch (1883), Creighton (1891, 1894), Burnet ve Clarke (1942) ve Burnet ve White'da (1972) bulunabilir.
1781-1782 salgını 1781'de Asya'da başladı ve 1782'nin başlarında Rusya üzerinden Avrupa'ya yayıldı. Bu salgın nispeten az sayıda ölüme neden oldu, ancak kendine özgü özelliği, hastalığın çocuklar ve yaşlılardan ziyade orta yaşlı insanları daha sık etkilemesiydi. 1803, 1833, 1837 ve 1847'de de oldukça şiddetli salgınlar meydana geldi. 1847-1848 salgını 1-847 Mart'ta Doğu Rusya'da başladı ve 1847-1848 kışında Avrupa ve İngiltere'ye ulaştı. Bu salgın özellikle yaşlılar arasında çok sayıda ölüme neden oldu.
1889 salgını da Rusya'dan Avrupa'ya geldi ve 1890'ın başlarında İngiltere ve Amerika'ya ulaştı. Hastalık gezginlerin hızıyla yayıldı. Virüs 1889'da ortaya çıktıktan sonra, sonraki yıllarda dört enfeksiyon dalgası daha yaşandı. İkinci ve üçüncü salgınlar özellikle çocuklar ve yaşlılar arasında çok sayıda ölüme neden oldu. Serolojik (Mulder ve Mazurel, 1958) ve diğer çalışmalar (Pereira, 1969), Asya, Hong Kong'daki influenza virüsleri ve at serotipi 2 ile ilgili virüslerin o dönemde mevcut olduğunu göstermektedir.
En şiddetli grip salgını 1918-1919'da meydana geldi. Bu salgının kesin yeri bilinmemekle birlikte Burnet ve Clarke (1942), virüsün Asya ve Avrupa'da bağımsız olarak gelişebileceğine veya Avrupa'ya (Çinli işçiler tarafından) getirilmiş olabileceğine inanmaktadır. Salgın dalgalar halinde meydana gelmiş ve ortalama bir insanı öldürmüştür. 20 ila 50 milyon insan. "İnsanlar, çoğunlukla gençler yaşıyor. 1918-1919 salgını muhtemelen domuz gribi virüsüyle ilişkili bir influenza A virüsü türünden kaynaklandı. Bu ilk olarak Laidlaw (1935) ve Shope (1936) tarafından öne sürüldü. ), ancak bu virüsün insanlardan domuzlara aktarılmış olması mümkündür, aksi yönde değil. Davenport ve diğerleri (1953) tarafından insan serumunda domuz gribi virüsüne karşı antikorların yaşla birlikte azalmasına ilişkin yoğun çalışmalar yapılmıştır. -1964), Hennessy ve diğerleri (1965), 1918-1919 1pg. salgınına neden olan virüsün serolojik olarak domuz gribi virüsü ile ilişkili olduğuna inanmak için nedenler vermektedir.
Çok sayıda ölüm, Burnet ve Clarke'ın (1942) virüsün olağandışı bir virülansa sahip olabileceğini öne sürmesine yol açtı. Diğer araştırmacılara göre (Zhdanov ve diğerleri, 1958; Kilbourne, 1960), ikincil bakteriyel enfeksiyonlardan kaynaklanan yüksek ölüm oranlarının nedenleri savaş koşulları ve antibiyotik eksikliği olabilir.Ancak bazı virüs mutantlarının oldukça öldürücü olması muhtemel görünüyor. çünkü gençleri de etkileyen 1781 “g. pandemik virüsü bu kadar yüksek bir ölüm oranına neden olmadı.
B. 1933 SONRASI DÖNEMDE VİRÜSTEKİ ANTİJENİK DEĞİŞİKLİKLER
H0N1 (Dünya Sağlık Örgütü, 1971) olarak adlandırılan ilk influenza virüsünün tanımlanmasından sonra, 1947'de H1N1 virüsü ortaya çıktığında (örneğin, A/FM/1/47) 1957'de antijenik değişiklikler meydana geldi. H2N2 virüsleri (örneğin, A/Singapur/1/57) ve 1968'de Hong Kong virüsü (A/Hong Kong/1/68) ortaya çıktığında. 1947'deki antijenik değişim, hemaglutinasyon antijenindeki bir değişiklikten (H0N1'den H1N1'e) oluşuyordu; 1957'de hem HA hem de NA, önceki yıllardaki virüslerin antijenlerinden (H1N1'den H2N2'ye) antijenik olarak tamamen farklıydı ve 1968'de Hong Kong varyantı HA'da anlamlı antijenik farklılık gösterdi (H2N2'den H3N2'ye).
İlk kez 1957'de Çin'in bir eyaletinde ortaya çıkan Asya influenza virüsü türü (H2N2), daha önce insanlarda dolaşan influenza virüslerinin H0N1 ve H1N1 alt birimlerinden antijenik olarak tamamen farklı olan HA ve NA alt birimlerini içeriyordu. İnfluenza virüsünün bu türü tarihte benzeri görülmemiş bir salgına neden oldu (Burnet ve White, 1972), ancak ölümlerin sayısı azdı. Bir sonraki ve şimdiye kadarki son grip pandemisine A/Hong Kong/68 virüsü neden oldu; buradaki NA alt birimleri "eski" Asya A2 virüsününkilere benziyordu ve HA alt birimleri antijenik olarak A/Hong Kong/68 virüsünden tamamen farklıydı. “eski” Asya türü (Coleman ve diğerleri, 1968; Schulman, Kilbourne, 1969; Webster, Laver, 1972).
B. ÖNCEKİ PANDEMİLERİN GENEL ÖZELLİKLERİ
İnfluenzanın insanlardaki pandemik doğası, insanlığın düzensiz aralıklarla yeni antijenik belirleyicilere sahip virüslerden etkilendiğini göstermektedir. Yukarıdaki bilgiler, bu salgınların çoğunlukla Güneydoğu Asya'da ortaya çıktığını ve gezginlerin hızında yayıldığını göstermektedir. Pandemilerin çoğu çocuklar ve yaşlılar arasında ölüm oranının artmasına neden oldu, ancak en az iki pandemi (1781 ve 1918) gençler arasında ölüm oranının artmasına neden oldu.
III. GRİP VİRÜSÜ GENOMUNUN ÖZELLİKLERİ
İnfluenza virüsü, en az yedi tek sarmallı RNA fragmanından oluşan parçalanmış bir genoma sahiptir. Bu parçalanma, farklı suşlarla karışık enfeksiyonlar sırasında genomun yeniden düzenlenmesine (“yeniden birleşme”) izin verir (bkz. Bölüm 7) ve influenzanın antijenik varyasyonu için temel olabilir. Hücrelerin iki farklı influenza A virüsüyle karışık enfeksiyonundan sonra, yüksek frekansta viral rekombinantlar oluşur.İnfluenza A virüsleri arasındaki yüksek rekombinasyon sıklığı ilk olarak Burnet (Burnet, Lind, 1949, 1951) tarafından gösterilmiş ve tarafından defalarca doğrulanmıştır. bu alanda çalışan diğer araştırmacılar (Hirst, Gotlieb, 1953, 1955; Simpson, Hirst, 1961; Simpson, 1964; Sugiura, Kilbourne, 1966) rekombinasyon sıklığının %97'ye kadar çıkabildiği tespit edilmiştir.
İnfluenza virüsleri arasındaki yüksek rekombinasyon sıklığı, hem in vitro hem de in vivo deneylerde karışık bir enfeksiyon sırasında antijen-hibrit virüslerin oluşumuna izin verir. Bunun biyokimyasal doğrulaması ilk kez Laver ve Kilbourne (1966) tarafından yapıldı; Laver ve Kilbourne (1966), genetik olarak stabil rekombinant X7 virüsünün, influenza virüs suşları NW-S (H0N1) ve RI/5+ (H2N2) ile karıştırılmış hücrelerden izole edildiğini keşfetti. ), H0N1 virüsünün HA alt birimlerine ve H2N2 virüsünün NA alt birimlerine sahiptir. Bu tür diğer birçok rekombinant influenza A virüsü daha sonra izole edilmiştir ve aslında bunlar "doğru sırayla" oluşturulabilir (Webster, 1970) (ayrıca bkz. 39). Hayvan (veya kuş) ve insan virüsleri arasındaki rekombinasyon yoluyla yeni influenza türlerinin oluşumu bölüm VII'de tartışılmaktadır. İnfluenza pandemilerine neden olan virüs türlerinin doğada bu şekilde ortaya çıkabileceğine dair kanıtlar elde edildi. İnfluenza B virüsleri arasında rekombinasyonlar da mümkündür (Perry, Burner, 1953; Perry ve diğerleri, 1954; Ledinko, 1955; Tobita, Kilbourne, 1974), ancak A ve B tipi influenza virüsleri arasında rekombinasyon hiçbir zaman keşfedilmemiştir.
IV. HEMAGLUTİNİN ALT BİRİMLERİ
VE YÜKSEK DEĞİŞKEN OLARAK NÖRAMİNİDAZLAR
ANTİJENLER
İnfluenza virüsünün hemaglutinasyon ve nöraminidaz aktiviteleri, viral partiküllerin yüzeyinde bir "sivri uçlar" tabakası oluşturan çeşitli alt birimlerle ilişkilidir (Laver ve Valentine, 1969; Laver, 1973).
Hemaglutiin ana yüzey antijenidir. Virüsün hücre yüzeyi ile etkileşiminden ve nötralize edici antikorların uyarılmasından sorumludur. Hemaglutinasyon antijeninin değişkenliği yeni influenza virüslerinin ortaya çıkmasına katkıda bulunur.
NA enzimi, influenza virüsü partikülünün ikinci virüs spesifik yüzey antijenidir.Antijenik olarak NA, HA'dan tamamen farklıdır (Seto, Rott, 1966; Webster, Laver, 1967).NA antikorları, virüsün enfektivitesini nötralize etmez ( çok yüksek konsantrasyonlar hariç) ancak virüsün enfekte olmuş hücrelerden salınmasını büyük ölçüde yavaşlatırlar (Seto ve Rott, 1966; Webster ve Laver, 1967; Kilbourne ve diğerleri, 1968; Becht ve diğerleri, 1971; Dowdle ve diğerleri). ., 1974) ve bu antikorlar, in vivo viral replikasyonun azaltılmasında ve yayılmasının önlenmesinde önemli bir rol oynayabilir.
enfeksiyonlar (Schulman ve diğerleri, 1968). NA'da normal değişkenlik de doğal olsa da, bu antijendeki farklılıklar belki de influenza epidemiyolojisi açısından daha az önemlidir.
Hemaglutinasyon alt birimleri, yaklaşık 215.000 bağıl molekül ağırlığına sahip, kesiti üçgen şeklinde, glikoprotein çubuk şeklinde yapılardır (33). Bunlar "tek değerlidir" ve (ile etkileşime girerler)
hücre reseptörleri yalnızca bir uçtadır (Laver ve Valentine, 1969). İzole edilmiş alt birimler, bir adjuvan varlığında hayvanlara uygulandığında oldukça immünojeniktir. Her virüs parçacığı yaklaşık 400 HA alt birimi içerir (Tiffany Blough, 1970; Schulze, 1973; Layer, 1973).
HA alt birimleri, bağıl molekül ağırlığı yaklaşık 25.000 ve 55.000 olan iki polileptitten oluşur (Cottpans ve diğerleri, 1970; Schulze, 1970; Laver, 1971; Skehel ve Schild, 1971; Stanley ve Haslam, 1971; Skehel, 1971, 1972; Klenk). ve diğerleri, 1972). Ağır ve hafif kolipeptit HA1 ve HA2 olarak adlandırılırlar. Oi6e, bu zincirler, bazı hücrelerde hafif ve ağır polipeptitlere bölünen, yaklaşık 80.000 moleküler ağırlığa sahip tek bir tül-peltit öncüsü olarak sentezlenir (Lazarowitz ve diğerleri, 1971, 1973; Skehel, 1972; Klenk ve diğerleri. ., 1972). Sağlam alt birimlerde, ağır ve hafif zincirler disülfür bağlarıyla bağlanarak bir dimer oluşturur ve her HA alt birimi bu tür iki veya üç dimerden oluşur (Laver, 1971).
HA alt biriminin hidrofobik ve hidrofilik uçları vardır (34). Hidrofilik uç, alt birimin biyolojik aktivitesinden sorumludur, hidrofobik uç ise viral zarfın lipidleri ile iletişim kurar. Alt birimin hidrofobik özellikleri, görünüşe göre C ile ilişkilidir. -terminus, polipeptit zincirinin (HA2) kalıplanmasıyla (Skehel, Waterfield, 1975) (OM. Bölüm 3).
Nöraminidaz alt birimi, yaklaşık 240.000 bağıl molekül ağırlığına sahip bir sglikoprotein yapısıdır. Merkezine dağınık kuyruklu veya küçük bir iplikçik tutturulmuş, 8-8-4 oyuklu kare, kutu şeklinde başlıklardan oluşur. sonunda baş (, 35) (Laver ve Valentine, 1969; Wrigley ve diğerleri, 1973). İzole edilen alt birimler tam enzimatik aktiviteye sahiptir ve hayvanlara bir adjuvanla uygulandığında oldukça immünojeniktir. Her virüs parçacığı yaklaşık 80 NA alt birimi içerir (Schulze, 1973; Laver, 1973). Bununla birlikte, bir viral partiküldeki NA alt birimlerinin sayısı, türün (Webster ve diğerleri, 1968; Webster ve Laver, 1972; Palese ve Schulman, 1974) yanı sıra üzerinde bulunduğu konakçı hücre tipine bağlı olarak değişebilir. virüs büyüdü
NA alt birimleri, filamentte veya kuyruğunda bulunan disülfit bağlarıyla birbirine bağlanan, bağıl molekül ağırlığı yaklaşık 60.000 olan dört glikosile lolipeptidden oluşur (ayrıca bkz. Bölüm 4). Çoğu suşta bu 4 polipeptit aynı görünmektedir ancak bazı suşlarda NA, boyutları biraz farklı olan iki tip polipeptitten oluşabilir (Webster, 1970a; Skehel, Schield, 1971; Bucher, Kilbourne, 1972; Laver, Baker). , 1972; Lazdins ve diğerleri, 1972; Downie, Laver, 1973; Wrigley ve diğerleri, 1973).
Enzimin aktif bölgesi ve antijenik determinantlar, NA alt biriminin başının çeşitli bölgelerinde lokalizedir (Ada ve diğerleri, 1963; Fazekas de St. Groth, 1963) ve bu başlar, hidrofilik özelliklere sahiptir. NA'nın "kuyruğu" hidrofobiktir ve alt birimi virüsün lipid kabuğuna bağlamaya hizmet eder (Laver, Valentine, 1969) (bkz. "29).
A. ALT BİRİMLERİN BİRBİRLERİNDEN İZOLASYONU VE AYRILMASI
Bazı influenza virüsü suşları için, viral partiküllerin SDS ile yok edilmesinden sonra selüloz asetat şeritleri üzerinde elektroforez yoluyla saf, sağlam HA ve NA alt birimleri elde edilebilir (Laver, 1964, 1971; Laver ve Valentine, 1969; Downie, 1973). Bu tekniği kullanarak bu alt birimlerden herhangi birinin izole edilmesinin başarısı, bunların oda sıcaklığında SDS ile denatürasyona karşı direncine bağlıdır. Bu kritere göre influenza virüsleri dört gruba ayrılabilir.
1. Denatüre alkole dirençli HA alt birimlerine sahip virüsler
SDS. Bu tür virüsler SDS ve elec tarafından yok edildiğinde
selüloz asetat şeritlerinde troforez, tüm viral proteinler,
“HA alt birimlerinin yanı sıra anyon olarak da göç ederler. Hemagluti-
katyon olarak göç eden nin saf halde izole edilebilir
biyolojik aktivitenin tamamen restorasyonu ile form
kovalent bağları yok etmeyen koşullar altında [örneğin
önlemler: A/Bel/42 (H0N1)].
2. Denatüreye dirençli NA alt birimlerine sahip virüsler
SDS. Saf, aktif NA alt birimleri siz olabilirsiniz
yukarıda açıklanan yöntemle bu virüslerden ayrıştırılır (örn.
önlemler: B/LEE/40).
3. Ne HA ne de NA'nın dena'ya dirençli olmadığı virüsler
Turasyon SDS'si. Bu durumda tüm viral proteinler göç eder.
anyonlar olarak ve yüzey alt birimlerinin hiçbiri
açıklanan yöntemler kullanılarak izole edilebilir [örneğin:
A/NWS/33 (H0N1)].
4. Hem HA hem de NA alt birimlerine sahip olan virüsler
SDS denatürasyonuna dayanıklıdır. Bu virüsler için her iki alt
elektroforez sırasında birimler - katyonlar halinde göç eder
ve bu şekilde bölünemez [örneğin:
A/Singapur? 1/57 (H2N2)].
İkinci virüs grubunun HA ve NA alt birimleri, 36'da gösterildiği gibi izole edilebilir. SDSHAHNA'ya (Downie ve Laver) karşı stabil olan bir kuş gribi virüsü (A/petrel/Avustralya/1/72(Hay6Mau5)) izole edildi. , 1973).Selüloz asetat elektroforezinde katyonlar halinde birlikte hareket ederler (bkz. 31, üst) ve bu şekilde ayrılamazlar.Bu bakımdan bu alt birimlerin iki tipi rekombinasyon kullanılarak genetik olarak ayrılmıştır (Webster, 1970b). Rekombinantlar elde etmek için, SDS denatürasyonuna duyarlı HA veya NA alt birimlerine sahip ana virüsler SDS-kararlı kuş virüsü HA ve NA alt birimleri daha sonra, selüloz asetat şeritleri (em. 31, IB orta ve alt) kimyasal analiz ve "monospesifik" antiserumların hazırlanması için gerekli olan saf alt birimler.
HA ve NA alt birimleri ayrıca viral partiküllerin schroteolitik enzimlerle işlenmesi yoluyla belirli influenza virüsü türlerinden izole edilebilir (Noll ve diğerleri, 1962; Seto ve diğerleri, 1966; Compans ve diğerleri, 1970; Brand ve Skehel, 1972; Wrigley). Bu yöntemle, yüzey alt birimlerinin viral parçacıklardan ayrılması, görünüşe göre, hidrofobiğin (alt birimlerin lipitlere bağlanmasından sorumlu olan polipentit zincirinin uçları) sindiriminin bir sonucu olarak meydana gelir. Bununla birlikte, HA alt ünitesinin diğer bölgelerinde de kısmi sindirim meydana gelmelidir, bunun sonucunda hemaglutinasyon aktivitesi bozulur ve bazı antijenik belirleyiciler kaybolur.
B. HEMAGLUTİNİN POLİPEPTİTLERİNİN (HA1 VE HA2) AYRILMASI
Hemaglutinasyon yapan alt birimlerin hafif ve ağır zincirleri, SDS-poliakrilamid gövde elektroforezi ile ayrılabilir. Bununla birlikte, hazırlık amacıyla en iyi ayırma, disülfür bağlarının kırıldığı koşullar altında gerçekleştirilen guanidin hidroklorür-ditiyotrietolün yoğunluk gradyanlı santrifüjlenmesiyle (Laver, 1971) veya bir guanidin hidroklorür-ditiyotrietol çözeltisi içinde tel filtrasyonuyla elde edilir (Laver, 1971). Webster, 1970a). Bu ayırma görünüşe göre hafif polipeptit zincirinin önemli hidrofobikliğine dayanmaktadır. Konsantre bir guanidin hidroklorür - ditiyotrietol çözeltisi içinde santrifüjleme sırasında, bu hafif polipeptit onu ağır zincirden daha hızlı sindirir ve jel filtrasyonu sırasında, görünüşe göre bu kadar güçlü ayrışan bir ortamda bile hafif zincirin olması nedeniyle hafif zincir ilk önce ortaya çıkar. iB bir monomer olarak mevcut değildir.
Bu açıklamalar yalnızca "öncünün tam proteolitik bölünmesinin meydana geldiği hücreler üzerinde büyüyen bir virüsten elde edilen HA alt birimleri" için geçerlidir.
HA polipeptidinin NAL ve HA2'ye dönüştürülmesi. Ayrıca, proteolitik sindirim tarafından üretilen HA alt birimlerinin ağır ve hafif polipeptitleri (HA1 ve HA2), muhtemelen sindirimin hafif zincirin hidrofobik bölgelerini yok etmesi nedeniyle bu şekilde ayrılamaz (Skehel, Laver, yayınlanmamış veriler).
B. NA1 VE NA2'NİN ÖZELLİKLERİ
İnfluenza A virüs türü BEL'in (H0N1) hafif ve ağır polipeptit zincirleri, ağır polipeptitin hafif zincirden önemli ölçüde daha fazla prolin içermesi dışında benzer bir polipeptit bileşimine sahipti (Laver ve Raker, 1972). Bununla birlikte, bu iki zincirin triptik bölünme ürünlerinin peptit haritaları tamamen farklıydı ve bu, bu zincirlerdeki farklı amino asit dizilerini gösteriyordu (Laver, 1971). Her iki polipeptit zinciri de karbonhidrat içerir, ancak glukozamin analizi, ağır polipeptitin hafif zincirden çok daha fazla karbonhidrat içerdiğini göstermektedir. Ağır zincirin nötr şekerlerin yanı sıra %9,4 N-asetilglukozamin içerdiği bulundu; yani muhtemelen yaklaşık %20 oranında karbonhidrat içerir.
D. FARKLI ÖZEL VİRÜSLERİN SAYISI
YÜZEYDEKİ ANTİJENİK DETERMİNANTLAR
BAŞINA ALT BİRİMLER
Farklı virüse özgü antijenlerin sayısı
virüsün hemalglutinasyon alt birimleri üzerindeki belirleyiciler
bilinmeyen grip (hemaglutinasyon yüzeyinde
alt birimlere özgü belirleyiciler de vardır
konakçı hücreye). Son deneyler göstermiştir
ancak Gon suşunun hemaglütinasyona uğrayan alt birimleri
Kong (H3N2) insan influenza virüsü en azından
en az iki ve muhtemelen daha fazla farklı virüse özgü
ikal antijenik belirleyiciler (Laver ve diğerleri, 1974).
Bu şu şekilde kanıtlanmıştır: Hemagglu
kalay alt birimleri influenza virüsünden türetildi
Hong Kong (A/Hong Kong/68, H3N2) ve antijenik varyantı
A/Memphis/102/72, antijenik bir sonucu olarak ortaya çıktı
sürüklenme. İmmünodifüzyon testleri, alt birimlerin
Hong Kong/68 virüsünün varyantlarında en az iki tane var
çeşitli türler antijenik belirleyiciler, va
Riant 1972 görünüşe göre en az üç kez taşıyor
kişisel belirleyiciler (37).
A/Hong Kong/68 ve A/Memphis/102/72 virüslerinin hemaglütinasyona uğrayan alt birimlerinin ortak bir belirleyicisi vardı. Bu belirleyiciye karşı antikorlar, immünodifüzyon, hem aglütinasyon inhibisyonu ve nötralizasyon testlerinde her iki virüsle çapraz reaksiyona girdi. Diğer belirleyicilere karşı antikorlar, Hong Kong/68 ve Memphis/72 virüsleri arasında herhangi bir anlamlı serolojik çapraz reaksiyon göstermedi. açıkça görülüyor ki, anti-
Genetik sürüklenme nedeniyle Hong Kong grip virüsü "spesifik" belirleyicilerinden birinde önemli değişikliklere uğradı. Laver ve ark.'dan veriler. (1974) (farklı antijenik determinantların aynı HA alt birimi üzerinde lokalize olduğunu ve viral partiküllerin antijenik olarak farklı alt birimlerin bir karışımına sahip olmadığını öne sürmektedir.
D. KONAK HÜCRE ANTİJENİNİN LOKALİZASYONU
İnfluenza virüsündeki konakçı hücre antijeninin ilk tanımları (Knight, 1944, 1946) bazı şüphelerle karşılanmış olsa da, bunların varlığı artık kesin olarak kanıtlanmıştır. Bu tür antijenlerin varlığı, çökelme reaksiyonları (Knight, 1944), immünodifüzyon reaksiyonları (Howe ve diğerleri, 1967), kompleman fiksasyonu (Smith ve diğerleri, 1955), hematglutinasyon inhibisyonu (Knight, 1944; Harboe ve diğerleri, 1961; Harboe, 1963a) ve hemaglutinasyonun inhibisyonunun bloke edilmesi yöntemi (Harboe, 1963b; Laver, Webster, 1966). Konakçı hücre antijeni esas olarak karbonhidratlardan oluşur ve HA ve NA alt birimlerinin polipeptitlerine bağlanır. Konakçı antijen (ve karbonhidratlar) ile viral partikülün iç proteinleri arasında hiçbir bağlantı tespit edilmedi.
İnfluenza virüslerinin konakçı antijeninin gizemli özelliklerinden biri, tavuk veya hindi embriyolarının allantois boşluğunda yetişen virüslerde tespit edilmesi (Harboe, 1963a), ancak örneğin ördeğin allantois boşluğunda yetişen virüslerde tespit edilmemesidir. Embriyolarda veya farelerin akciğerlerinde veya çeşitli hücre kültürlerinde.Bu hücreler üzerinde büyüyen virüsler, enfekte olmamış konakçı hücrelerden alınan ekstraktlara karşı elde edilen antiserumlarla yapılan maglütinasyon inhibisyon reaksiyonunda hiçbir şekilde inhibe edilmedi.Bu muhtemelen virüsün bu hücreler konakçı hücrenin "karbonhidratlarını içerir", ancak bazı nedenlerden dolayı ya antijenik özelliklere sahip değildirler ya da onlara karşı yönlendirilen antikorlar hem aglütinasyonunu engellemez.
E. KONAK HÜCRE ANTİJENİNİN ROLÜ
Karbonhidrat bileşeni viral zarfın oluşumunda çok önemli bir rol oynayabilir. İzole edilmiş NA ve HA alt birimleri, SDS'nin yokluğunda toplanır. Bu, bu alt birimlerin hem hidrofobik hem de hidrofilik uçlara sahip olduğuna (Laver ve Valentine, 1969) ve belki de konakçı hücrenin karbonhidrat bileşeninin HA ve NA alt birimlerinin bir ucunun hidrofobikliğini belirlediğine inanmak için neden verir.
G. ALT BİRİMLERİN ANTİJENİK DEĞİŞKENLİĞİ
HEMAGLUTİNİNLER VE NÖRAMİNİDAZLAR TESPİT EDİLDİ
MONOSPESİFİK ANTİSERUMLAR
Yakın zamana kadar V-antijeninin veya grip virüsü partikülünün zarfının bölünmez bir şey olduğuna inanılıyordu, ancak bu öyle değil. Artık V antijeninin HA, NA ve konakçı hücre viral antijeninden oluştuğu bilinmektedir. İnfluenza virüsleri arasındaki antijenik ilişkiler üzerine daha önce yayınlanmış çalışmaların hiçbirinde bu durum söz konusu değildir.<не принималось во внимание, <в результате чего уровни реакций перекреста ■между данными вирусами зависели от используемых тестов. Так, широко используемая штаммоспецифическая реакция связывания комплемента выявляла перекрестные реакции окзк между нейраминидазными, так и между гемагглютипи-рующими антигенами, :в то время как реакция перекреста между нейраминидазным"и антигенами может выявляться также и в РТГА. Это происходит потому, что в интактном вирусе может возникать «стерическая нейтрализация» нейр-аминидазной активности антителами к гемагглютинину и наоборот (Laver, Kilbourne, 1966; Schulman, Kilbourne, 1969; Easterday et al., 1969; Webster, Darlington, 1969).
Bireysel influenza virüsü antijenlerinin antijenik sürüklenmesi, bu antijenlerin viral partikülden ayrılmasından sonra (Webster ve Darlington, 1969) veya "bu antijenlerin genetik olarak ayrılmasıyla (Kilbourne ve diğerleri, 1967) incelenebilir. Böylece, şimdi monospesifik antiserumların kullanımıyla birlikte, “Bu iki antijene karşı, bireysel influenza virüsü antijenlerinin antijenik sürüklenmesine ilişkin ayrıntılı serolojik çalışmalar yapmak mümkündür.
V. ANTİJENİK SÜRÜŞME MEKANİZMASI
(MİNÖR ANTİJENİK
DEĞİŞTİRMEK)
A. GİRİŞ
İnfluenza A virüsleri arasında gözlemlenen antijenik varyasyonun iki farklı belirtisi, yani yeni antijenik alt tiplerin aniden ortaya çıkması ve bir alt tip içinde kademeli kayma, muhtemelen birbiriyle ilişkili değildir.
Genel olarak sürüklenmenin (influenza A virüslerinin antijenik olarak yeni türlerle sırayla değiştirilmesi) sonuç olduğu kabul edilir.
Virüsün mutasyonel değişkenliği ile immünolojik seçilimin tat etkileşimi
Bu seçim mekanizmasının önemi, az miktarda antiepileptik varlığında influenza virüslerinin çoğaltılması yoluyla antijenik varyantların deneysel üretimi ile doğrulanmıştır (Burnet, Lind, 1949; Archetti, Horsfall, 1950; Isaacs, Edney, 1950; Edney, 1957). ; Laver, Webster, 1968) veya kısmen bağışıklığa sahip hayvanlarda (Gerber ve ark.
1955, 1956; Magill, 1955; Hamre ve diğerleri, 1958). Epidemiyolojik
Gözlemler aynı zamanda böyle bir mekanizma ile de tutarlıdır.
ağzın kaybolmasına makul bir açıklama sunan
insan popülasyonundan ortaya çıkan türler.
Antijenik sürüklenmenin mekanizmasını açıklamak için çeşitli hipotezler öne sürülmüştür. Bunlardan biri (Francis, 1952, 1955, 1960; Jensen ve diğerleri, 1956; Jensen, 1957), influenza virüsünün yüzeyinin, belirli bir türün tüm suşlarına ait olan ancak bireysel olarak mevcut olan bir antijen mozaiğinden oluştuğunu öne sürmektedir. farklı oranlarda veya farklı yerlerde antijenik suşlar. Antijenik değişkenlik, bu antijenlerin viral zarf üzerinde çıkıntılı konumdan "Gizli konum"a doğru yer değiştirmesinin bir sonucu olmalıdır.
1956, 1957; Takatsy, Furesz, 1957), yavaş yavaş antijenler
değişkenlik rotasında yer almaktadır. Bu hipotezlerin her ikisi de gerektirir
nispeten fazla sayıda antijenin varlığı
fakat vi'nin yüzeyinde farklı protein molekülleri
Jensen ve ark. (1956), 1953 yılında araştırma için mevcut olan geniş influenza A virüs koleksiyonundaki birçok suşun her birinde, farklı miktarlarda ve/veya lokasyonlarda bulunan antijenlerin sayısının 18'e kadar ulaştığını bulmuşlardır. Bu verilerin birçok yeni varyantı kapsayacak şekilde genişletilmesi O zamandan bu yana keşfedilen bulgular, "özellikle kabul edilirse, her virüste daha da fazla sayıda antijen bulunduğunun varsayılmasına yol açacak gibi görünüyor"
İnsanlardan, domuzlardan, atlardan ve kuşlardan izole edilen türlerin aynı kompleksin parçası olması mantıklıdır.
İnfluenza virüslerinde bu kadar çok sayıda bireysel protein molekülünün varlığı, viral RNA'nın kodlama kapasitesi ile ilişkilendirilemez (Laver, 1964), ayrıca elektron mikroskobik (Lafferty, Oertelis, 1963), immünokimyasal (Fazekas de St. Groth) , 1961, 1962; Fazekas de St. Groth, Webster, 1963, 1964) ve “biyokimyasal (Laver, 1964) veriler, viral zarf üzerinde çok sınırlı sayıda antijenik olarak ayırt edilebilir protein molekülünün varlığıyla daha tutarlıdır.
Son deneylere dayanarak, antijenik sürüklenmenin, "antijenik belirleyicileri değiştirilmiş ve dolayısıyla antikorların varlığında büyümede avantaj sağlayan" mutant viral parçacıklardan oluşan bir bağışıklık popülasyonunun seçilmesinin sonucu olduğu varsayılmaktadır (Tablo 26). “Bir in vitro sistemdeki antikorlar tarafından seçilim yoluyla izole edilen antijenik mutantların hemaglutinasyon birimlerinin polipeptitlerindeki amino asit dizisinde değişiklikler olduğu ortaya çıktı (Laver, Webster, 1968) (Şekil 38).
Peptit haritaları, doğal antijen sürüklenmesi sırasında hem hafif hem de ağır polipeptit zincirlerinin amino asit dizisinde de değişiklikler olduğunu ortaya çıkarmıştır (39).
Bu sonuçlar, influenza virüsleri arasındaki antijenik varyasyonun, antijenik proteinlerinin amino asit sekansındaki değişikliklerle ilişkili olduğunu göstermektedir. Her ne kadar dizideki bazı değişiklikler rastgele olsa da, antijenik belirleyiciler üzerinde çok az etkiye sahip veya hiç etkisi yok, bu değişikliklerin bazılarının antijenik belirleyicileri etkilemesi muhtemeldir.
HA alt birimleri, karşılık gelen antikor moleküllerine tam olarak "uyma" kabiliyetini azaltır. Ancak deney, bu değişikliklerin spesifik olarak viral proteinlerin antijenik determinantlarında mı yoksa molekülün diğer bazı bölgelerinde mi mevcut olduğunu göstermiyor.
Grip virüsleri RTGA'da asimetrik çapraz geçiş reaksiyonları sergiler. Fazekas de St.-Groth (1970) virüsleri adlandırdı
benzer şekilde davranan "daha yaşlı" ve "daha genç" türler. Dahası, "doğal antijenik sürüklenme sürecinde," eski "influenza virüslerinin "genç" suşların yerini aldığını öne sürdü (Fazekas de St. Groth, 1970). Son varsayım "sadece çok" seyrek verilerle doğrulanmıştır.
B. SÜRÜKLENMENİN YÖNÜNÜ ÖNGÖRMEK MÜMKÜN MÜ?"
İnfluenza virüsünün antijenik değişikliklere uğrama yeteneği büyük bir endişe kaynağı olmaya devam etmektedir. Aşı üretimi başlamadan önce her yeni varyantın izole edilmesi ve tanımlanması gerekiyor, böylece her yeni varyant, aşılarla kontrol altına alınamadan çok sayıda insanı enfekte etme potansiyeline sahip.
Bu bağlamda, laboratuvarda antijenik sürüklenmeyi tahmin etmek için girişimlerde bulunuldu, ancak tamamen başarılı olamadı. Hannoun ve Fazekas de St. Paris'teki Pasteur Enstitüsü'nden Groth'un A/Hong Kong/68 (H3N2) suşu, küçük konsantrasyonlarda antiserum varlığında pasajlandı. Bu tür birkaç büyüme döngüsünden sonra, bu deneysel koşullar altında artık antijenik mutasyonlara maruz kalmayan bir varyant elde edildi. Yazarlar, bu varyantın, Yeni Zelanda serotipi içindeki evrimin son noktasını temsil ettiğini ve bu nedenle ortaya çıkan bir virüs olduğunu öne sürdü (1970'den sonra beklenebilirdi). Bu varsayım, influenzanın Londra varyantının keşfedilmesiyle desteklendi. İlk kez 1972'de izole edilen virüs (A/England/42/72), antijenik olarak Hannoun ve Fazekas de St. Groth'un bir yıl önce laboratuvarlarında elde ettiği ilk mutanta (Fazekas de St. Groth, Hannoun, 1973).
Son "eski" varyanttan türetilen aşıların, insanlarda ortaya çıkabilecek tüm NZ varyantlarına karşı koruma sağlayacağı umuldu, ancak daha sonra 1973 ve 1974'te influenza A virüsleri izole edildi (örn. A/Port Chalmers/1/73). A/England/42/72 türünden antijenik olarak farklıydı ve aynı zamanda yapay olarak üretilen varyanttan önemli ölçüde farklıydı; bu da doğal koşullar altında sürüklenmenin tahmin edilen yönde gitmediğini gösteriyordu.
Her durumda, laboratuvarda antiserum varlığında geçiş yoluyla elde edilen varyant yalnızca NA'da sürüklenme yaşarken, doğal değişkenler hem NA hem de NA'da sürüklenme sergiler. Dolayısıyla "geleceğin" aşısı olan lotidimomayı hazırlama girişimi başarısız oldu.
B. ANTİJENİK SÜRÜKLENME SIRASINDA BELİRLİ ANTİJENİK BELİRTİCİLERDE ÖNEMLİ DEĞİŞİKLİK OLASILIĞI
Bölüm IV'te, Hong Kong influenza virüsünün HA alt birimlerinin en az iki tip antijenik belirleyiciye sahip olduğu ve evrim sürecinde Hong Kong influenza virüsünün antijenik sürüklenmesi yoluyla bir virüsün oluştuğu gösterilmiştir (A). /Memphis/102/72), burada bu antijenik belirleyicilerden biri
termiyaant önemli bir antijenik değişiklik yaşadı (büyüklük olarak antijenik kaymayla karşılaştırılabilir), diğeri "sürüklendi" (om. 37). Bu iki virüs için bu belirleyicilerden ilkine “spesifik”, ikincisine ise “ortak” adını verdik.<(Laver et al., 1974).
"Spesifik" determinantın antikorları, immünodifüzyon, HRT veya enfeksiyon nötralizasyon testlerinde iki virüs arasında herhangi bir çapraz reaksiyon tespit etmez. Başka bir belirleyici(ler) her iki virüs için de ortaktı (ancak bu determinantta bir miktar antijenik sürüklenme meydana geldi) ve bu "ortak" belirleyici(ler)e karşı aynı antikorlardan dolayı Hong Kong/68 ve Memphis/72 virüsleri arasında çapraz reaksiyonlar bulundu. ).
Farklı IB hayvanları, aynı izole edilmiş HA alt birimleri preparatı ile immünize edildiklerinde farklı belirleyicilere değişen derecelerde tepki verir. İmmünolojik yanıttaki bu farklılıklar, farklı serumlarla test edildiğinde bazen iki virüs arasında gözlemlenen çapraz reaksiyonlardaki değişkenliği açıklayabilir.
IB ONE'daki önemli antijenik değişikliğe rağmen
belirleyicilerden, ağır ve hafif poli peptit haritalarından
Hong Kong/68 virüslerinin HA alt birimlerinin peptidleri (HA1 ve HA2)
■ve Memphis/72 büyük ölçüde benzerdi (bkz.
39), buna dayanarak süreçte olduğu varsayılmaktadır.
Hong Kong virüsünün evrimi ve eğitim. Meme çeşidi
bu polipeptitlerin amino asit dizisinde fis/72
yalnızca nispeten küçük değişiklikler meydana gelir. İzme
Peptid haritalarında ağır (HA1) olarak farklılıklar meydana gelir,
ve hafif (HA2) polipeptit zincirleri; bazıları
rastgele değişiklikler olabilir, diğerleri seçilir
Antikorların baskısı altında.
D. NÖRAMİNİDAZDA ANTİJENİK DEĞİŞİKLİKLER
Nöraminidaz antijeninde gözlenen antijenik sürüklenme
hem A tipi hem de B tipi influenza virüsleri değil (Paniker, 1968;
Schulman, Kilbourne, 1969; Schild ve diğerleri, 1973; Curry ve diğerleri.
1974). Muhtemelen seçilim yoluyla (baskı altında) meydana gelir
antikorlar) değiştirilmiş bir diziye sahip mutantlar
NA alt birim polipeptitlerindeki amino asit içeriği
(Kendal, Kiley, 1973). Şu ana kadar anti-karşıtlık elde etmek mümkün olmadı.
Laboratuvardaki genetik sürüklenme. NA'ya karşı antikorlar nötr değildir
virüsün bulaşıcılığı biliniyor; bu nedenle muhtemelen
Bu antijenin değişkenliği hayatta kalma açısından daha az önemlidir
virüsünün HA değişkenliğinden daha fazla (Seto, Rott, 1966; Dowdle ve ark.,
E. B TİPİ İNFLUENZA VİRÜSLERİNİN ANTİJENİK DEĞİŞKENLİĞİ
İnfluenza B virüsleri arasında antijenik sürüklenme, influenza A virüsleri arasında olduğu gibi yaklaşık olarak aynı ölçüde meydana gelir, ancak bunlarda görülen önemli antijenik kaymalar, influenza B suşları arasında bulunamadı Antijenik sürüklenme (her iki antijendeki değişiklikleri de içerir - HA ve NA (Chakraverty, 1972a) , b; Curry ve diğerleri, 1974).B suşlarının antijenik varyasyonunun mekanizması muhtemelen influenza A virüslerinin doğasında bulunan mekanizmaya benzer, ancak “hiçbir biyokimyasal çalışma yapılmamıştır.
E. KUŞ VE HAYVANLARDAKİ İNFLUENZA VİRÜSLERİNDE ANTİJENİK DEĞİŞİKLİKLER
Aşağı memelileri ve kuşları enfekte eden influenza virüsleri arasındaki antijenik değişiklikler iyi araştırılmamıştır ve bunlar hakkında çok az bilgi mevcuttur. Ancak bazı sonuçlara dayanarak, antijenik sürüklenmenin suşlarda da (memeli ve kuş gribi) meydana geldiği, ancak insanları enfekte eden influenza virüslerinde olduğundan daha az oranda meydana geldiği varsayılabilir.
Domuz ve at gribi virüslerinde antijenik sürüklenme gözlemlenmiştir (erotip 2) (Meier-Ewert ve diğerleri, 1970; Pereira ve diğerleri, 1972), ancak kuş gribi virüslerinde antijenik sürüklenmeye ilişkin hiçbir veri yoktur. Belki de bunun nedeni kuşların, özellikle de evcil kuşların, insanlardan veya atlardan daha kısa yaşamalarıdır. İnsanlarda, influenza A virüsünün her bir sonraki varyantı hızla bir öncekinin yerini alır, ancak birbirinden farklı olan virüsler genellikle hayvanlar ve kuşlar arasında aynı anda dolaşmaktadır.
VI. ANTİJENİK KAYMA MEKANİZMASI (ÖNLÜ ANTİJENİK DEĞİŞİKLİKLER)
Başka türden antijenik değişiklikler sırasında virüsün yüzey alt birimleri önemli antijenik değişimlere maruz kalır. Bu büyük değişimlerle birlikte yüzey antijenlerinden birinde veya her ikisinde ani ve tam bir değişiklik olur, böylece popülasyonda bağışıklığın bulunmadığı "yeni" virüsler ortaya çıkar. Bunlar, grip pandemilerine neden olan virüslerin ta kendisidir.
İnsan H2N2 influenza virüsleri, önemli antijenik değişimlerin moleküler yönlerini incelemek için doğal bir sistem sağlar. 1957 yılında insanlarda ortaya çıkan virüsler, antijenik olarak H1N1 suşlarından tamamen farklı olan HA ve NA alt birimlerine sahipti. H2N2 virüsleri
"yeni" pandemik Hong Kong türünün ortaya çıktığı 1968 yılına kadar antijenik sürüklenme yaşadı. .A2 virüsleri (H2N2) ve Hong Kong suşu (H3N2) Çin kökenlidir. Hong Kong virüsü önceki A2 virüsleriyle aynı NA'ya sahipti ancak antijenik olarak farklı bir NA'ya sahipti (Coleman ve diğerleri, 1968; Schulman ve Kilbourne, 1969). Bu, A2 tipi influenza virüslerinin (tavuk embriyolarında yetiştirilen) temsilcilerinin izole edilmiş HA alt birimlerine spesifik antiserumlar kullanılarak açıkça gösterilmiştir. Bu monospesifik serumlar, ördek embriyolarında yetiştirilen virüslerle RTGA'da kullanılmıştır (Webster, Laver, 1972), bu da sorunları ortadan kaldırmıştır. NA'ya ve konakçı hücre antijenine karşı hemaglutinasyona neden olan antikorların sterik baskılanması; bu, tam virüslere karşı serum kullanıldığında ortaya çıkabilir.
Bu testlerin sonuçları (Tablo 27), 1957 ile 1957 yılları arasında izole edilen "eski" A2/Asya suşlarının hemaglutinin antijenleri arasındaki serolojik yazışmayı gösterdi.
1968 ve Hong Kong virüsü yoktu (1968). İnfluenza salgınının ilk 3 yılında izole edilen üç Hong Kong suşu arasında çok az değişiklik vardı veya hiç yoktu (Webster ve Laver, 1972). O halde Hong Kong grip virüsünün “yeni” HA alt birimleri nereden geldi? "Yeni" hemaglutinasyon alt birimlerinin oluşumunun iki olası nedeni var gibi görünüyor: ya mevcut bir insan grip virüsünden mutasyon sonucu ortaya çıkmışlar ya da hayvan veya kuş gribi virüsleri gibi başka bir kaynaktan gelmişler.
"Eski" influenza A2/Asya virüsünün tek bir mutasyonu, HA alt birimlerinin polipeptit zincirlerinin katlanmasına ve böylece tamamen yenilerinin oluşmasına neden olabilir.
antijenik belirleyiciler. Hong Kong influenza virüsünün HA alt birimleri, daha önceki A2 tipi virüslerden böyle bir mutasyonla elde edilmişse, "eski" ve "yeni" alt birimlerin polipeptitlerindeki amino asit dizisinin yakın olması gerekir. Antijenik sürüklenme süreci sırasında HA alt birimlerinin antijenik determinantlarından birinde meydana gelen tam bir değişim daha önce tarif edilmişti ve belirleyicilerden birindeki bu "değişime", görünüşe göre, proteinde herhangi bir önemli genel değişiklik eşlik etmiyor. HA polipeptitlerinde “H” Osti amino asitlerinin takipçisi. Bununla birlikte, eğer "yeni" alt birimler mutasyon ve seçilim yoluyla ortaya çıkmazsa ve hayvan influenza virüsünden geliyorsa, bu durumda bunların polipeptit zincirleri, amino asit dizilimi açısından "eski" A2/Asya virüslerinin lolipaptit zincirlerinden önemli ölçüde farklı olabilir.
HA alt birimleri, Hong Kong influenza pandemisinin başlangıcından önce 1968'de elde edilen üç influenza A2/Asya suşundan ve 1968, 1970 ve 1971'de dünyanın farklı yerlerinde izole edilen üç Hong Kong influenza virüsü suşundan izole edildi. Antijenik sürüklenme nedeniyle A2/Asya döneminin sonunda izole edilen üç virüs, önemli antijenik farklılıklar göstermektedir. Öte yandan yeni salgının ilk 3 yılında izole edilen üç Hong Kong suşu neredeyse hiçbir antijenik varyasyon göstermiyor.
Bu altı viral suşun her birinden izole edilen HA alt birimleri, guanidin hidroklorür ve ditiyotreitol ile muamele edilerek ayrıştırıldı ve bunların hafif ve ağır hedefleri, santrifüjleme yoluyla ayrıldı (Laver, 1971). İzole edilmiş polipeptit hedeflerinin her biri, trypsinizlendi ve triltik peptitler haritalandı. Haritalar, 1968'de izole edilen "eski" A2 virüslerinin hemaglutine edici alt birimlerinden gelen polipeptit zincirlerinin, amino asit bileşimi açısından "yeni" Hong Kong türlerinin lolileptid zincirlerinden önemli ölçüde farklı olduğunu gösterdi! (40 ve 41). Aynı zamanda “yeni” polipeltidlerin “eski” olanlardan mutasyon yoluyla elde edilmediği varsayılmıştır (Laver, Webster, 1972).
Bu sonucun bir açıklaması, çerçeve kayması mutasyonunun tamamen farklı amino asit dizilerine sahip polipeptitlerle sonuçlanmasıdır. Bununla birlikte, böyle bir mutasyonun meydana gelmesi halinde, işlevsel hemaglutinasyon birimi oluşturabilen polipeltidlerle sonuçlanması pek olası görünmemektedir. İkincisi, esas olarak bazik amino asitleri etkileyen mutasyonlar meydana gelebilir, böylece tristik peptitlerin haritaları, loliletidlerin genel amino asit dizisinde herhangi bir önemli değişiklik olmaksızın önemli ölçüde farklılık gösterebilir.
Artık bazı hayvan influenza virüslerinin, insan influenza virüsünün Hong Kong suşunun olası öncüleri olduğunu gösteren veriler elde edilmiştir. İnfluenza virüsünün iki suşu, A/at/Miami/1/63 (Heq2Neq2) ■ ve A/duck/Ukrayna / 1963 yılında, yani insanlarda Hong Kong gribinin ortaya çıkmasından 5 yıl önce, atlardan ve ördeklerden izole edilen 1/63 (Hav7Neq2)'nin, antijenik olarak Hong Kong suşuna benzer olduğu gösterilmiştir (Coleman ve diğerleri, 1968; Masurel, 1968; Kaplan, 1969; Zakstelskaja ve diğerleri, 1969; Tumova, Easterday, 1969; Kasel ve diğerleri, 1969).
At ve ördek virüslerinin HA alt birimleri, insan influenza virüsü A/Hong Kong/1/68'in (H3N2) Hong Kong suşunun alt birimleri ile RTGA'da ve immünodifüzyon testinde çapraz reaksiyonlar verdi. Üstelik at, ördek ve insan virüslerinin hafif zincirlerinin peptit haritaları neredeyse aynıydı; bu da bu üç suşun hafif zincirlerinin neredeyse aynı amino asit sekanslarına sahip olduğu varsayımına yol açtı (Laver ve Webster, 1973). Bu, Hong Kong influenza virüsünün HA alt birimlerinden ve ördek//Ukrayna ve at/Miami suşlarından (2. serotip) alınan lolipeptid hafif zincirlerinin peptit haritalarının hemen hemen aynı olduğu ve haritadan önemli ölçüde farklı olduğu 42'de açıkça görülmektedir. "eski" virüs Asya/68'den alınan lolipeptid hafif zincirleri.
Bu sonuçlar, at ve kuş virüsleri ile insan Hong Kong türü virüsünün, ortak bir progenitörden genetik rekombinasyonla ortaya çıkmış olabileceğini ve Hong Kong influenza virüsünün kökenini açıklamak için mutasyona alternatif bir mekanizma önerdiğini öne sürüyor.
Son araştırmalar yabani kuş serumlarının, insanları enfekte eden influenza virüslerinde bulunan antijenlere karşı antikorlar içerdiğini göstermiştir (Dünya Sağlık Örgütü, 1972). Ek olarak, grip virüslerinin yakın zamanda insan popülasyonlarından uzak yabani kuşlardan izole edilmesi, gribin binlerce yıldır kuşların doğal bir enfeksiyonu olduğunu düşündürmektedir (Downie ve Laver, 1973).
Rasmussen (1964), pandemik influenza virüslerinin bu tür hayvan virüslerinden rekombinasyon sürecinin bir sonucu olarak ortaya çıktığını öne süren ilk kişi olmuştur.Daha sonra Tumova ve Pereira (1965), Kilbourne (1968) ve Easterday ve diğerleri (1969) antijen elde etti. -insan influenza virüsleri ile hayvan ve kuş influenza virüslerinin suşları arasında in vitro genetik rekombinasyon yoluyla hibrit virüsler. Yakın zamanda Webster ve diğerleri (1971, 1973), in vivo deneylerde yeni bir pandemik influenza virüs suşunun ortaya çıkışını simüle etti (bunlar Aşağıda açıklanan).
VII. EK DELİL,
SÜRECİN ROLÜNÜN ONAYLANMASI
YENİ KÖKENİNDEKİ REKOMBİNASYONLAR
PANDEMİK GRİP VİRÜSLERİ
Sunulan biyokimyasal veriler, Hong Kong virüsünün HA antijeninin önceki Asya suşlarından gelen tek bir mutasyona bağlı olduğu teorisini desteklemiyor. Bu nedenle in vitro veya in vivo laboratuvar çalışmalarından veya özellikle gözlemsel çalışmalardan elde edilen herhangi bir kanıtın olup olmadığı sorulabilir.
Bu da yeni virüslerin rekombinasyon yoluyla ortaya çıktığını öne süren teoriyi destekleyecektir.
A. İN VİTRO ÇALIŞMALARDAN ELDE EDİLEN VERİLER
Memelilerin ve kuşların birçok influenza A virüsünün antijenik hibritleri (rekombinantları), tavuk embriyolarının veya hücre kültürlerinin çeşitli influenza A virüsleriyle karışık enfeksiyonundan sonra izole edildi (Tumova, Pereira, 1965; Kilbourne, Schulman, 1965; Kilbourne ve diğerleri, 1967; Kilbourne, 1968; Easterday ve diğerleri, 1969). Bu çalışmalar Kilbourne ve arkadaşlarının incelemelerinde özetlenmiştir. (1967) ve Webster ve La-ver (1971). Artık karışık yüzey antijenlerine (Webster, 1970b) veya büyüme potansiyeline (Kilbourne, Murphy, 1960; Kilbourne ve diğerleri, 1971) veya diğer biyolojik özelliklere (McCahon, Schild, 1971) sahip rekombinant influenza A virüslerinin yapılabileceği açıktır. emir.
Böylece laboratuvarda "yeni" influenza virüsleri oluşturulabilir, ancak "yeni" virüslerin rekombinasyonu ve seçiminin doğal koşullar altında in vivo olarak da meydana gelebileceğine dair kanıtlar ancak son zamanlarda elde edilmiştir (Webster ve diğerleri, 1971).
B. IN VIVO SİSTEMİNDE YAPILAN ÇALIŞMALARDAN ELDE EDİLEN VERİLER
1. Sistemdeki rekombinasyonun gösterilmesi
Kilbourne (1970), iki farklı influenza A virüsü türü arasındaki rekombinasyonun, deneysel koşullar altında bile sağlam hayvanlarda henüz gösterilmediğini kaydetti. Rekombinasyonun in vivo gerçekleşip gerçekleşemeyeceğini bulmak için iki sistem kullanıldı: Birincisi, konakçı hayvanda ebeveyn virüslerden sadece biri çoğaldı, ikincisinde ise her iki ebeveyn virüs çoğaldı. Hayvanlara yüksek dozlarda enjekte edildi. Parental virüslerin yok edilmesi ve 3. günde virüslerden en az biri çoğalınca hayvanlar öldürüldü.Akciğer süspansiyonları allantois membranlarında rekombinant (antijen-hibrit) virüslerin varlığı açısından doğrudan incelendi; parental virüsler antiviral ajanlarla baskılandı. spesifik antiserumlar (Webster, 1970b).
İlk sistemde domuzlara domuz gribi virüsü - HH"C (A/domuz/Wisconsin/1/67) ve kümes hayvanı ateşi virüsü tip A - HPV (Danimarka/27) (43) karışımı enjekte edildi. İkincisi bunu yapar. Domuzlara uygulandıktan sonra bulaşıcı virüs yaymaz.
Her iki virüsün de çoğaldığı ikinci sistemde hindilere VChV ve hindi influenza virüsü - VGI (A/Y"ndyuk/Massachusetts/3740/65) bulaştırıldı. (Allantoion membran sisteminde antijenik hibritlerin belirtildiği gibi) VGI (G) ile -VChP (N) (Hav6Neql) ve VChP (N)-VGI(1Ch) (Havl-N2) izole edildi.
Tanımlanan rekombinasyonun in vivo olarak meydana geldiği fikrine iki olası itiraz vardır. İlk olarak virüs seçimi için kullanılan hücre kültürü sisteminde rekombinasyon meydana gelebilir; ikincisi, bu antijenik hibritlerin genetik olarak stabil olup olmadığı ve sadece fenotipik olarak karışık parçacıklar olup olmadığı bilinmiyor.
Antijenik olarak hibrid virüslerin seçimi, ana virüsleri nötralize etmesi gereken çok yüksek antikor konsantrasyonlarında doğrudan gerçekleştirildiğinden, ilk itiraz göz ardı edilebilir. Anti-HES hibrid virüslerinin, enfekte olmuş bir konakçının dışından izolasyon yoluyla ortaya çıkmadığına dair daha kesin kanıtlar elde etmek için, bir alçı süspansiyonundan karışık hasat virüs plaklarının elde edilmesi, tek tek plakların izole edilmesi ve bireysel plaklardan elde edilen virüs numunelerinin karakterize edilmesi gerekliydi. HPV + HIV ile karıştırılmış hindi akciğerlerinin süspansiyonundan izole edilen %25'lik plaklar rekombinant virüslerdi Hibrit virüsler, her iki ebeveyn virüsün yapay bir karışımı ile enfekte edilmiş kontrol kültürlerinden izole edilmedi.
Rekombinant virüslerin genetik stabilitesi, "klonlanmış antijen hibrit virüslerin hayvan konakçılara yerleştirilmesiyle" sağlandı (Webster ve diğerleri, 1971). Örneğin, HPV(H)-CVI(N), (HavliN2) taşıyan bir antijen-hibrit virüsle enfekte olan tavuklar, geçici bir enfeksiyondan öldü ve 3 gün sonra yine bu kuşların akciğerlerinden izole edilen virüs, B4n(H)-(Havl-N2) içeren virüsün saf kültürü. Diğer antijen-tibrid virüsleri de yakın zamanda hayvanlardan izole edildi ve genetik olarak stabil oldukları ortaya çıktı.
2. Virüsün doğal bulaşması ve seçilim
Açıklanan çalışmalar, iki farklı influenza A virüsü suşunun, aynı hayvana aynı anda enjekte edilmesi durumunda in vivo olarak yeniden birleşebileceğini göstermiştir.
Ancak iki farklı influenza A virüsünün yüksek dozda hayvanlara aynı anda uygulanması, muhtemelen doğada bulunmayan yapay bir sistemdir. Rekombinasyonun daha doğal koşullar altında gerçekleşip gerçekleşmeyeceğini araştırmak için, iki farklı influenza A virüsünün duyarlı kuşlardan oluşan bir sürüde eş zamanlı olarak yayılmasına izin verildi: HIV ile enfekte iki hindi (A/i-ndkj/Vieconsin/66 (Hav6N2]), 30 adet hassas korumalı hindiden oluşan bir sürüye yerleştirildi. 2 gün sonra HPV ile enfekte iki hindi daha aynı sürüye verildi. Sürüden her gün iki hindi kesildi ve akciğer örnekleri ebeveyn ve hindilerin her birinin varlığı açısından incelendi. allantois membranlarında antijen-hibrit virüsler ve plak izolasyonu ve virüs tanımlaması yoluyla (Webster ve diğerleri, 1971).IPV, korunan kuşlar arasında hızla yayıldı ve girişten 3 gün sonra tespit edildi; AIV, bir kuşhaneye yerleştirildikten 9 gün sonrasına kadar tespit edilmedi. enfekte kuş sürüsü (Webster ve ark. . Bu tür deneyler üç kez yapıldı ve her deneyde antijenik hibritler 9-10. günde izole edildi; bu melezler VChP (N)-VGI (N)'ye sahipti ancak hiçbir ters melez izole edilmedi. İzole edilmiş rekombinant virüs muhtemelen ana virüslere göre bir büyüme avantajına sahipti; Her deneyde bu virüs bir veya daha fazla kuştan baskın olarak izole edildi. Bu tür bir rekombinasyon yoluyla doğada "yeni" bir grip virüsü türünün ortaya çıkması ve salgın bir tür haline gelmesi için, "yeni" virüsün bazı seçici avantajlara sahip olması gerekir. Bu seçici avantaj, popülasyonun genellikle bağışık olmadığı antijenlere sahip olmak olabilir, ancak virüsün aynı zamanda duyarlı konakçılara geçme yeteneğine de sahip olması gerekir. Sunulan deneylerde her iki olasılık da incelenmiştir. Örneğin, rekombinant virüs zaten mevcut olduğunda, normal kuşlar sürüye dahil edildi, ancak rekombinantlar baskın tür haline gelmeyi başaramadı ve temas eden tüm normal kuşlar, ebeveyn HPV'sinin neden olduğu enfeksiyondan öldü.
3. İn vivo sistemde “yeni” influenza virüsünün seçimi ve iletimi
İnfluenza A virüslerinin yeni suşlarının rekombinasyon yoluyla doğal olarak ortaya çıkabileceğini varsayarsak, bu virüslerin baskın veya yeni salgın suşlar haline gelmek üzere nasıl seçilebileceğini göstermek önemlidir. Olası bir seçim mekanizması, rekombinasyon ve seçilimin gerçekleşmesi olabilir.<в иммунных животных. Опыты Webster и Campbell (1974) показали, что рекомбинация и селекция «нового» штамма -вируса гриппа может происходить у индеек с низкими уровнями антител к НА одного родительского вируса и к NA другого родительского вируса (45).
NA HIV (A/indkj/Wisconsin/bb) ve NA HPV'ye karşı düşük düzeyde antikorlara sahip olan hindiler, HPV ve HIV ile karışık enfeksiyona maruz kalmıştır. Karışık enfeksiyondan 1-2 gün sonra hindilerin soluk borusunda hem parental virüsler hem de HPV (H)-HIV (N) taşıyan rekombinant influenza virüsü mevcuttu. Karışık enfeksiyondan sonraki 6. günde yalnızca rekombinant B4n(H)iBrH(N) virüsü mevcuttu. 7. günde "karışık bir enfeksiyonun ardından hindiler öldü ve sadece HPV (H)-HIV (N) içeren rekombinant influenza virüsleri izole edildi. Tüm virüsler allantois membranlarından veya embriyolardan aşırı dilüsyonlarda izole edildi ve herhangi bir antikor tespit edilmedi." Rekombinant virüslerin seçimi için kullanılır. 5. günde sürüye dahil edilen tüm bağışık olmayan kuşlar, geçici bir enfeksiyondan ve “yalnızca izole edildiklerinden (rekombinant influenza virüsleri).
İmmün olmayan veya hiperimmün hindilerin karışık enfeksiyonundan sonra, rekombinant influenza virüsünün tecriti gerçekleşmedi. Bu nedenle, bir virüsün NA'sına ve diğerinin NA'sına karşı düşük seviyelerde antikorlara sahip olan kuşların karışık enfeksiyonu, rekombinantların seçimi için ideal koşulları sağlar. Enfeksiyonun ardından, her iki ana virüs de sınırlı bir ölçüde çoğalır, böylece bağışıklık sisteminin kendisi uyarılır ve bu da ana virüsleri ortadan kaldırır. Bu şekilde rekombinantlar seçilebilmekte ve gerekli virülans özelliklerine ve diğer bireylere bulaşma yeteneğine sahip olmaları koşuluyla bu rekombinantlar salgın hastalığa neden olabilmektedir.
Bu deneyler, nispeten doğal koşullar altında, farklı influenza A virüsleri arasında rekombinasyonun meydana geldiğini ve yeni virüslerin, her iki ebeveyn suş üzerinde seçici bir avantaja sahip olabileceğini göstermektedir. Bu deneyler, alt memelilerde, kuşlarda ve insanlarda görülen tüm yeni grip virüslerinin bu mekanizma yoluyla ortaya çıktığını kanıtlamaz, ancak bu mekanizmanın, "yeni virüslerin ortaya çıkma yollarından biri" olduğunu ortaya koyar.
B. DOĞADAKİ İNFLUENZA VİRÜSLERİNİN REKOMBİNASYONUNA İLİŞKİN VERİLER
Yukarıdaki deneyler, yeni influenza virüsü türlerinin "in vitro ve in vivo olarak elde edilebileceği" konusunda hiçbir şüpheye yer bırakmıyor ve benzer süreçlerin doğada da meydana gelebileceğini öne sürüyor. Bununla birlikte, rekombinasyonun doğada meydana geldiğine dair herhangi bir kanıt var mı? Bu kanıt, dolaylıdır ve şunları içerir: 1) insanlardan ve alt memelilerden ve kuşlardan izole edilen influenza virüsleri arasındaki antijenik benzerlikler; 2) İnfluenza virüsleri için kesin bir konakçı aralığının bulunmaması.
1. İnsanlar, alt memeliler ve kuşlardaki influenza virüsleri arasındaki antijenik ilişkiler
İnsan ve hayvan influenza virüsleri arasında rekombinasyonun doğada mümkün olduğunu gösteren kanıtlar, insanlardan, alt memelilerden ve kuşlardan alınan bazı influenza virüslerinin aynı olmasa da benzer yüzey antijenlerine sahip olduğunun bulunmasından kaynaklanmaktadır.
a) NA'ya bağlı antijenik ilişkiler. Bazı kuş gribi virüslerinin NA'sı antijenik olarak erken insan influenza virüslerinin NA'sına çok benzer. Örneğin ördek virüsü (A/uzha/Almanya/1868/68), insan virüsleri HOS ve H1N1'in NA'sına benzer bir NA'ya sahiptir (Schild ve Newman, 1969). Domuzlardan izole edilen grip virüsleri aynı zamanda insan virüslerinin NA antijeniyle ilişkili bir NA antijeni de taşır.
H0N1 (Meier-Ewert ve diğerleri, 1970). Benzer şekilde HIV (A/indkj/MA/65), aynı olmasa da insan influenza virüslerine benzer bir NA'ya sahiptir. H2N2 (Pereira ve diğerleri, 1967; Webster ve Pereira, 1968; Schild ve Newman, 1969). Diğer kuş gribi virüsleri NA antijenlerine sahiptir; ■ at gribi virüsleri tip 1 ve NA'larıyla yakından ilişkilidir. 2 (Webster ve Pereira, 1968; Dünya Sağlık Örgütü, 1971). Bu nedenle, VChP'nin NA'sı (A/ VChP/ Holland/27), at gribi virüsü tip 1'in NA'sına (A/ losha, d/ Prag/1/57) benzer. Bu türler arası ilişkiler, influenza virüslerinin revize edilmiş isimlendirmesinde kullanılmaktadır (Dünya Sağlık Örgütü, 1971). Kuş gribi virüslerinin sekiz farklı alt tipi vardır ve bunlardan dördünde insan ve at gribi virüslerinin NA antijenleriyle ilişkili NA antijenleri bulunur.
b) HA antijeninin neden olduğu antijenik eşleşmeler. İnsan virüslerinin HA antijenleriyle ilişkili HA antijenlerine sahip olan, alt memelilerden ve kuşlardan izole edilen influenza virüslerinde daha az benzer örnek bulundu. Hong Kong HA'ları, ördek/Ukrayna/63 ile at/tip 2 virüsleri arasındaki yazışmalar yukarıda tartışılmıştı.Son zamanlarda Almanya'daki ördeklerden izole edilen bir virüsün (A/ut-ka/Almanya/1225/74) olduğu tespit edildi. ) HA virüsleri influenza ailesi Asya'ya benzer bir HA'ya sahiptir. Böylece daha fazla virüs izole edildikçe tespit edilen eşleşme sayısı da artıyor.
2. Ev sahiplerinin çemberi
İnfluenza A virüsleri her zaman kesin olarak tanımlanmaz
konakçıya yüksek özgüllük (bkz. Easterday, Tumova, 1971;
Webster, 1972). Örneğin Hong Kong grip virüsü
domuzlardan, köpeklerden, kedilerden, babunlardan ve şebeklerden izole edilmiştir. Viru
İnfluenza A/Hong Kong (H3N2) virüsleri de yakın zamanda izole edilmiştir.
tavuklardan ve buzağılardan (Zhezmer, 1973). Bu virüsler deneysel
ancak buzağılara ve tavuklara aktarıldı; her durumda
virüs izole edildiği konakta çoğaldı
keten. Böylece buzağı gribi virüsü solunum yolu enfeksiyonuna neden oldu
buzağılarda enfeksiyon ve tavuk gribi virüsü çoğaldı, ancak
tavuklarda hastalık belirtileri gösterdi (Schild, Campbell, Web
Hong Kong gribinin Russ'u tavuklarda çoğalamadı.
Hong Kong grip virüsü durumunda, bu virüsün
doğal enfeksiyona neden olacak şekilde adapte olmuştur
diğer sahiplerden alındı ve böylece koşullar yaratıldı
çifte enfeksiyon ve genetik olduğunda
etkileşim
D. BİR NOKTAYI DESTEKLEYEN VERİLERİN ÖZETİ
YENİ SUŞLARIN ORTAYA ÇIKIŞINA İLİŞKİN GÖRÜŞLER
REKOMBİNASYON YOLUYLA GRİP VİRÜSÜ
1. İnsanlardaki grip salgınlarına yalnızca virüsler neden olur
mi influenza tip A ve yalnızca bu tipteki influenza virüsleri
alt memelilerden ve kuşlardan izole edilmiştir. Grip virüsleri
B tipi sürekli olarak in vitro yeniden birleşir, ancak doğada bunlar
Böyle bir genetik bilgi kombinasyonu oluşmayabilir
[ki bu da "bir salgının ortaya çıkmasına" olanak tanıyacak
influenza virüsü tip B suşu. Virüsler arasındaki rekombinasyonlar
Grip A ve B tipleri gösterilmemiştir.
2. Daha önce sunulan biyokimyasal veriler aşağıdaki gibidir:
gerçekleşme olasılığının düşük olduğunu belirtmek
İnfluenza virüsünün “yeni” pandemik türleri
önceki influenza virüslerinden mutasyon anlamına gelir
kişi.
3. Pandemiye neden olabilecek yeni grip virüsleri
koşullar altında rekombinasyon ve seçilim yoluyla ortaya çıkabilir
in vivo deney.
4. Antijenik ve biyokimyasal yazışmalara dayalı
vii hemalglutinasyon ve nöraminidaz arasında
insan influenza virüslerinin tigenleri, alt memeliler
ve kuşlar genetik alışverişin var olduğunu öne sürüyor
ve doğada.
Sunulan kanıtlar ikinci derecedir; Gelecekteki pandemik suşların halihazırda evcil veya yabani hayvan influenza virüslerinden izole edilmiş olanlarla aynı antijenlere sahip olduğu tespit edilirse daha doğrudan kanıtlar elde edilebilir (ayrıca bkz. Bölüm 15).
VIII. GELECEKTEKİ ANTİJEN DEĞİŞİKLİKLERİ
GRİP VİRÜSLERİ VE FIRSATLARI
DEĞİŞKENLİK TAHMİNLERİ
VE HASTALIK KONTROLÜ
A. PANDEMİNİN DÖNGÜSEL DOĞASINA İLİŞKİN OLASI AÇIKLAMALAR
Yaşlı insanların serumlarındaki antikorların incelenmesine dayanarak, Hong Kong trip virüsüne benzer bir grip virüsünün daha eski zamanlarda insanlar arasında var olduğu ve 19. yüzyılın sonlarındaki grip salgınının nedeni olabileceği varsayılabilir. bkz. bölüm II). yaşlı insanlar - at gribi virüsleri tip 2 ve Asya'nın NA'sına karşı antikorlar da düşük titrelerde tespit edildi. İnfluenza virüslerinin NA'sına karşı antikorlar. Aynı ayatis-vortok'ta Hong Kong veya Asya'ya karşı antikorlar tespit edilmedi, buna karşın antikorlar At gribi virüsünün NA'sı
Tip 2 belirlendi. Bu, önceki ve mevcut salgınlardan benzer HA alt birimlerine ancak farklı NA alt birimlerine sahip virüslerin sorumlu olduğunu göstermektedir. Epidemiyolojik veriler, pandemik insan influenza virüslerinin döngüsel olarak ortaya çıktığı inancına yol açmıştır. NA homolojisine ilişkin veri eksikliği, aynı Hong'un aynı Hong Kong influenza virüsü 19. yüzyılın sonunda ve yine 1968'de mevcut. 19. yüzyılın sonunda var olan influenza virüsünün, Hong Kong influenza virüsüne bazı antijenik benzerlikler gösteren bir HA alt birimine sahip olması daha olası görünüyor, ancak Tamamen farklı bir NA antijeni taşıdı.Serolojik verilere dayanarak, bu NA, antijenik olarak at gribi NA tip 2 ile ilişkilidir. Katılımlı veya katılımsız bazı hayvan rezervuarlarından virüslerin ortaya çıkması sonucu yeni bir influenza virüs döngüsü meydana gelebilir. Sürü bağışıklığının “artık insan nüfusunu bundan korumadığı” dönemde rekombinasyon.
Yeni influenza suşlarının ortaya çıkmasıyla ilişkili bir başka olgu da önceki suşların gözle görülür şekilde ortadan kaybolmasıdır. Bu, toplumun çoğunluğu için artık tehlikeli olmayan influenza virüslerinin örneklerinin toplanmasına yönelik ilgi eksikliğinden kaynaklanıyor olabilir (Fenner, 1968), ancak bu açıklama olası değildir, çünkü deneyimler, insan influenza virüslerinin insanlarda bir arada bulunmadığını göstermiştir. herhangi bir uzun süre boyunca doğa. Antijenik kaymanın bir sonucu olarak ortaya çıkan suşların ortadan kaybolması, kendi kendini yok etme ile açıklanabilir; serolojik olarak yeni virüs eski antikorların seviyesini arttırır, böylece eski virüsün yayılmasını önler. Önemli bir antijenik değişimden sonra her bir alt tipin eski suşlarının (Fazekas de St. Groth, 1970) ortadan kaybolması daha az açıktır ve henüz tatmin edici bir açıklamaya sahip değildir.
B. GELECEKTE İNFLUENZA VİRÜSÜNDEKİ ANTİJENİK DEĞİŞİKLİKLERİN KONTROL OLASILIKLARI
Yukarıda sunulan biyolojik, biyokimyasal ve immünolojik veriler, insan influenza virüslerinde önemli antijenik değişimlerin rekombinasyon yoluyla meydana geldiğine dair yalnızca dolaylı kanıtlar sağlar. Doğada yeni bir pandemik suş oluşturmak için farklı influenza virüsleri arasında yeniden sınıflandırma tespit edilebilirse daha kesin veriler elde edilecektir.Böyle bir olayın nadir olması bu olasılığı etkili bir şekilde ortadan kaldırır.Bu soruna alternatif bir yaklaşım, influenza virüslerini hayvan popülasyonlarından izole etmektir. bir sonraki ortaya çıkmadan önce, insanlar için pandemik tür, yani
İnfluenza virüslerinden oluşan bir “banka” oluşturuyoruz. İnsanlar arasında pandemiye neden olan bir sonraki türün ortaya çıkmasından sonra bu virüs, “bisiklet”teki virüslerle karşılaştırılabilecek ve oluşumuna ilişkin veriler elde edilebilecek. Yeni influenza virüslerinin kaynağı olarak yaban hayatı popülasyonları büyük ölçüde göz ardı edilmiştir. Dünya çapındaki kuş popülasyonları, memelilerden veya insanlardan daha uzun süreler boyunca yüksek yoğunluklu kolonilerde yaşamaktadır. İlginç bir şekilde, kuş gribi virüslerinin sekiz farklı alt tipi halihazırda tanımlanmış olup bunlardan altısı - Bu nedenle, özellikle yuvalama mevsiminin sonunda, büyük kuş kolonilerinde doğada influenza virüslerinin araştırılmasına başlamak mantıklıdır.Bu tür ekolojik çalışmalar, doğada var olan influenza virüsünün farklı alt tiplerinin sayısının belirlenmesine ve sonunda yeni suşların nasıl ortaya çıktığını ortaya çıkarabilir. Eğer sadece sınırlı sayıda influenza A virüsü varsa, o zaman gelecekte insanlar için büyük bir felaket anlamına gelen bu virüslerin kontrol altına alınmasını düşünmek mümkün olacaktır.
EDEBİYAT
Ada G.L., Lind P.E., Laver W.G.J. gen. Microbiol., 1963, v. 32, s. 225.
Andrewes S.N. Calif. Med., 1956, v. 84, s. 375.
Andrewes S H. N. İngilizce. J. Med., 1957, y. 242, s. 197.
Andrewes S.N. . İçinde: Virolojide Perspektifler (M. Pollard, ed.); New York,
Wiley, 1959, s. 184-196.
Archetti İ. , Horsfall F.L.J. exp. Med., 1950, v. 92, s. 441. Becht H., Hammerling U., Rott R. Virology, 1971, v. 46, s. 337. Marka S M., Skehel J. J. Nature (Londra ). Yeni Biol., 1972, v. 238, s. 145. Bucher D.J., Kilbourne E.D.J. Virol., 1972, v. 10, s. 60. Burnet F. M. “Hayvan Virolojisinin Prensipleri”, 1. baskı. New York , 1955, s. 380. Burnet F.M., Clarke E. Grip, Melbourne , Walter ve Eliza Hall Enstitüsü, 1942.
Burnet F.M., Lind P.E. Aust. J. Sci., 1949, v. 22, s. 109.
Burnet F.M., Lind P.E.J. gen. Microbiol., 1951, v. 5, s. 67.
Burnet F.M., White D.O. Bulaşıcı Hastalıkların Doğal Tarihi, 4. baskı. Londra - New York, Cambridge Üniv. Basın, 1972, s. 202-212.
Chakraverty P. Bull. Wld Hlth Org., 1972a, v. 45, s. 755.
Chakraverty P. Bull. Wld Hlth Org., 1972b, v. 46, s. 473.
Çu SANTİMETRE. J. Hyg., Epidemiol., Microbiol., Immunol., 1958, v. 2, s. 1.
Coleman M.T ., Dowdle W.R., Pereira H.G., Schitd G.C, Chang W.K-Lancet, 1968, v. 2, s. 1384.
Compans R.W., Klenk H.D., Caliguiri L.A., Choppin P.W. Virology, 1970
Tipik bir ortaya çıkan enfeksiyon olarak İnfluenza A/H1N1: İnfluenza virüslerinin genel özellikleri, değişkenliği, yeni pandemik suşların ortaya çıkışı
Grip virüsleri - RNA virüsleri - aileye aittir. Orthomyxoviridae ve A, B ve C virüslerine bölünmüştür (Tablo 1).
Tablo 1.
İnfluenza virüslerinin karşılaştırmalı özellikleri
| Kriterler | A tipi | Tip B | Tip C |
| Hastalığın şiddeti | ++++ | ++ | + |
| Doğal rezervuar | Yemek yemek | HAYIR | HAYIR |
| İnsan salgınları | Aramalar | Aramıyor | Aramıyor |
| İnsan salgınları | Aramalar | Aramalar | Sebep olmaz (sadece sporadik hastalıklara) |
| Antijenik değişiklikler | Kayma, sürüklenme | Sürüklenen | Sürüklenen |
| Bölümlere ayrılmış genom | Evet | Evet | Evet |
| Rimantadine duyarlılık | Hassas | Hassas değil | Hassas değil |
| Zanamivire duyarlılık | Hassas | Hassas | - |
| Yüzey glikoproteinleri | 2 (HA, NA) | 2 (HA, NA) | 1(HA) |
İnfluenza virüsü küresel bir şekle ve 80-120 nm boyuta sahiptir. Çekirdek, 11 viral proteini kodlayan 8 fragmandan oluşan, tek sarmallı negatif bir RNA zinciridir.
İnfluenza A virüsleri doğada yaygındır ve hem insanları hem de çok çeşitli memelileri ve kuşları enfekte eder. B ve C tipi grip virüsleri yalnızca insanlardan izole edilmiştir.
Epidemi açısından önemli olan, influenza A virüsünün 2 alt tipi - H3N2 ve H1N1 ve influenza virüsü tip B'dir (A.A. Sominova ve diğerleri, 1997; O.M. Litvinova ve diğerleri, 2001). Bu tür bir ortak dolaşımın sonucu, aynı salgın mevsiminde farklı ülkelerde farklı etiyolojilere sahip grip salgınlarının gelişmesiydi. Salgın virüs popülasyonunun heterojenliği, influenza virüslerinin değişkenliğinin farklı doğası nedeniyle de artar, bu da farklı evrimsel dallara ait virüslerin eşzamanlı dolaşımına yol açar (O.M. Litvinova ve diğerleri, 2001). Bu koşullar altında, insanların çeşitli patojenler tarafından eşzamanlı enfeksiyonu için önkoşullar yaratılır, bu da karışık popülasyonların oluşmasına ve hem birlikte dolaşan alt tip virüsler arasında hem de aynı alt tip içindeki suşlar arasında yeniden sıralamaya yol açar (O.I. Kiselev ve diğerleri, 2000). ).
İnfluenza virüsü tiplerinin sınıflandırılması, iki yüzey glikoproteini - hemaglutinin (HA) ve nöraminidaz (NA) arasındaki antijenik farklılıklara dayanmaktadır. Bu sınıflandırmaya göre influenza virüsleri 3 türe ayrılır - influenza virüsleri tip A, tip B ve tip C. 16 HA alt tipi ve 9 NA alt tipi vardır.
Pirinç. 1. İnfluenza A virüslerinin sınıflandırılması ve hayvan ve kuş türleri - enfeksiyonun insanlara bulaşma zincirindeki ara ve son konakçılar.
Hemaglutinin alt tipi 16 (H16) yakın zamanda keşfedildi
Not: ∗ NA 7 ve NA 7-NA8 atlarda da tespit edildi
İncirde. Şekil 1, influenza A virüslerinin alt tiplerini ve bunların ara konakçılarını ve doğal rezervuarlarını (göçmen kuşlar) göstermektedir. İnfluenza A virüslerinin ana konakçıları, influenza ile ilişkili türleri içerir.
İnsan popülasyonunda şu ana kadar influenza A virüsünün yalnızca üç alt tipi tanımlandı: HA1, HA2 ve HA3. Ayrıca virüsler yalnızca iki tür nöraminidaz içerir - NA1 ve NA2 (Şekil 1). 1918 salgınından başlayarak geçen yüzyılda istikrarlı dolaşımları kanıtlanmıştır (R.G. Webster ve diğerleri, 1978; K.G. Nicholson ve diğerleri, 2003).
İnfluenza A virüsleri (daha az ölçüde B) NA ve NA'nın yapısını değiştirme yeteneğine sahiptir. İnfluenza A virüsü iki tür değişkenlik ile karakterize edilir:
- HA ve NA'da karşılık gelen bir değişiklikle birlikte viral genomdaki nokta mutasyonları (antijenik sürüklenme);
- yeniden sınıflandırma/rekombinasyon (antijenik değişim) yoluyla virüsün bir veya her iki yüzey glikoproteininin (NA ve NA) tamamen değiştirilmesi, bunun sonucunda influenza pandemiklerine neden olabilen virüsün temelde yeni bir varyantının ortaya çıkması.
İnfluenza B virüsü için antijenik değişkenlik yalnızca sürüklenme ile sınırlıdır, çünkü Görünüşe göre kuşlar ve hayvanlar arasında doğal bir rezervuar yok. İnfluenza C virüsü, antijenik yapının daha fazla stabilitesi ile karakterize edilir ve yalnızca lokal salgınlar ve hastalığın sporadik vakaları bununla ilişkilidir.
Biraz ilgi çekici yeni grip virüsü türlerinin ortaya çıkması insan popülasyonunda ve buna bağlı salgınlarda (Şekil 2). İncirde. Şekil 2, influenza A virüslerinin neden olduğu yirminci yüzyıldaki pan-epidmilerle ilişkili ana antijenik değişimleri göstermektedir:
- 1918'de pandemiye H1N1 virüsü neden oldu;
- 1957'de - H2N2 suşu A/Singapur/1/57;
- 1968'de - H3N2 suşu A/Hong Kong/1/68;
- 1977'de - H1N1 suşu A/SSCB/1/77 (birçok bilim adamı bunu bir salgın olarak değerlendirmedi, ancak bu suşun ortaya çıkmasıyla birlikte, 2 influenza A virüsü suşunun - H3N2 ve eş zamanlı olarak birlikte dolaşımıyla bir durum ortaya çıktı) H1N1).
1986 yılında Çin'de A/Taiwan/1/86 virüsü, 1989 yılına kadar süren A/H1N1 influenza salgınına neden oldu. Bu virüsün sürüklenme varyantları 1995 yılına kadar hayatta kaldı ve yerel salgınlara ve hastalığın ara sıra vakalarına neden oldu. Moleküler biyoloji çalışmalarının sonuçlarına göre bu yıllarda A/H1N1 virüsünün genomunda çok sayıda mutasyon ortaya çıktı. 1996 yılında A/H1N1 influenza virüsünün iki antijenik varyantı ortaya çıktı: A/Bern ve A/Beijing; bunların özellikleri yalnızca antijenik değil aynı zamanda coğrafi ayrılıktı. Böylece, Rusya'da influenza A/Bern virüsü 1997-98 influenza salgınında aktif rol aldı. Aynı sezonda, ülkenin doğusunda A/Pekin virüsü türlerinin dolaşımı kaydedildi. Daha sonra 2000-2001'de. İnfluenza A/H1N1 virüsü, Rusya'daki grip salgınının etken maddesi oldu. Modern influenza A/H1N1 virüsleri düşük immünojenik aktiviteye sahiptir; taze izole edilmiş virüs izolatları yalnızca memelilerin (insan grubu 0 ve kobaylar) eritrositleriyle etkileşime girer.
Pirinç. 2. İnsan popülasyonunda yeni influenza virüsü türlerinin ortaya çıkışı ve buna bağlı pandemiler
İnfluenza A virüsleri geçtiğimiz yüzyılda önemli genetik değişikliklere uğradı ve bu durum insanlarda yüksek ölüm oranlarına sahip küresel salgınlara yol açtı. En büyük grip salgını (H1N1) 1918-1919'daydı. ("İspanyol"). 1918'de ortaya çıkan virüs belirgin bir sürüklenmeye uğradı; başlangıç (Hsw1N1) ve son (H1N1) varyantları değişim olarak değerlendiriliyor. Virüs, 20 milyon kişinin hayatına mal olan yıkıcı bir salgına neden oldu (ölülerin yarısı 20 ila 50 yaş arası gençlerdi (M.T. Osterholm, 2005).
J.K.'nin araştırması Tanbenberger ve diğerleri, (2005), 1918 pandemisine neden olan virüsün, kuş gribi virüsü ile insan gribi virüsü arasında bir yeniden sınıflandırma olmadığını gösterdi; H1N1 virüsünün 8 geninin tümü, kuş virüsünün varyantlarına, kuş gribinden daha çok benzerdi. insan olan (Şekil .3). Bu nedenle R.B. Belshe (2005) kuş gribi virüsünün, kişiden kişiye bulaşarak (ara konağı atlayarak) insanları enfekte etmesi gerekir.
Kuş gribi virüslerinin, yüksek patojenite ve pandemilere neden olma yeteneği ile karakterize edilen yeni "insan" grip virüslerinin ortaya çıkmasına "katıldığını" belirtmek önemlidir (E.G. Deeva, 2008). Bu virüsler (H1N1, H2N2 ve H3N2), farklı bir dizi dahili genlere sahipti; bunların kökeni, kuş ve domuz virüsleriyle filogenetik ilişkilerini gösteriyor.
Pandemik suşların köken mekanizmaları nelerdir ve pandemik potansiyeli yüksek derecede patojenik bir virüsün ortaya çıkması için hangi biyolojik özellikler gereklidir?
İnfluenza A virüsleri, viral genomun segmentasyonundan kaynaklanan karışık enfeksiyonun bir sonucu olarak yeniden sınıflandırıcıların yüksek sıklıkta ortaya çıkmasıyla karakterize edilir. Belirli bir gen bileşiminin bir yeniden sınıflandırıcısının baskınlığı, geniş bir farklı yeniden sınıflandırıcılar kümesinden, belirli koşullar altında üremeye en çok adapte olanın seçildiği seçimin sonucu olarak kabul edilir (N.L. Varich ve diğerleri, 2009). Genomik bölümlerin suşa özgü özellikleri, seçici olmayan koşullar altında yeniden sınıflandırıcıların gen bileşimi üzerinde güçlü bir etkiye sahip olabilir. Yani influenza virüslerinin ayırt edici özelliği, başta HA geni olmak üzere gen segmentlerinin sekizinde sık ve öngörülemeyen mutasyonların meydana gelmesidir. Yeniden sınıflandırma, yeni viral varyantların ortaya çıkmasında, özellikle de pandemik suşların kökeninde önemli bir rol oynamaktadır. Ve bazen bir pandemi sırasında daha yüksek öldürücülüğe sahip bir virüsün ortaya çıkma olasılığı göz ardı edilemez.
Modern araştırmalar, yeni A/H1N1 virüsünün gen yapısının karmaşık olduğunu ve giriş bölümünde de belirttiğimiz gibi, bileşiminin Kuzey Amerika'daki domuzları etkileyen domuz gribi genlerini içerdiğini göstermiştir; Avrupa ve Asya'daki domuzları etkileyen domuz gribi genleri; kuş gribi genleri; insan grip genleri. Esasen yeni virüsün genleri dört farklı kaynaktan geliyor. İnfluenza A/H1N1 virüsünün bir mikrografı Şekil 2'de gösterilmektedir. 4.
Pirinç. 4. İnfluenza A/H1N1 virüsünün mikrofotoğrafı
DSÖ, "Grip Laboratuvarları için Kılavuzlar"ı yayınladı ve viral gen dizisi ve reassortant yeni influenza A/H1N1 virüsünün uzunluğu hakkında yeni veriler sundu (izolat A/California/04/2009): HA, NA, M, PB1, PB2, RA, NP, NS. Bu veriler, virüsün yeni bir pandemik varyantının oluştuğunu ve bağışıklık eksikliği nedeniyle enfeksiyona karşı evrensel bir savunmasızlık yarattığını gösteriyor. İnfluenza virüsünün pandemik varyantlarının en az iki mekanizma yoluyla ortaya çıktığı açıkça ortaya çıkıyor:
- hayvan/kuş ve insan influenza virüsleri arasındaki yeniden sınıflandırma;
- Hayvan/kuş virüsünün insanlara doğrudan adaptasyonu.
Pandemik influenza virüslerinin kökenini anlamak için, enfeksiyonun doğal rezervuarının özelliklerini ve konakçıyı değiştirirken bu virüs ailesinin evrimsel yollarını incelemek önemlidir. Bu virüsün 16 HA alt tipinin tamamının taşınmasıyla kanıtlandığı gibi, su kuşlarının influenza A virüslerinin (yüzyıllar boyunca bu ara konakçılara adapte olmuş) doğal bir rezervuarı olduğu zaten iyi bilinmektedir ve tartışılabilir. Suda 400 günden fazla yaşayabilen kuş dışkıları (Kuş gribi..., 2005) yoluyla, bir rezervuardan su içildiğinde virüsler diğer hayvan türlerine bulaşabilmektedir. (K. G. Nicholson ve diğerleri, 2003). Bu, farklı konakçılardan ve farklı coğrafi bölgelerden gelen influenza A virüslerinin farklı alt tiplerinin nükleik asit dizilerinin filogenetik analizi ile doğrulanır.
Nükleoprotein gen dizilerinin analizi, kuş gribi virüslerinin 5 spesifik konakçı soyunun ortaya çıkmasıyla evrimleştiğini gösterdi: vahşi ve evcil atların, martıların, domuzların ve insanların virüsleri. Üstelik (!) insan ve domuz gribi virüsleri, kardeş grup olarak adlandırılan bir grup oluştururlar, bu da onların yakın ilişkisini ve doğal olarak ortak bir kökene işaret eder. İnsan gribi virüslerinin ve klasik domuz virüsünün öncüllerinin tamamen kuş kökenli olduğu görülmektedir. Orta Asya ülkelerinde bilinen nedenlerden dolayı domuz eti popüler değildir ve bu hayvanlar hayvancılıkta neredeyse hiç yoktur. Bu, (örneğin Çin'den farklı olarak), bu bölgenin evcil hayvan popülasyonunda ana ara konakçıya (domuzlar) sahip olmadığı, dolayısıyla Orta Asya bölgesinde pandemik virüslerin "ortaya çıkma" olasılığının daha düşük olduğu gerçeğine yol açmaktadır. Çin'de, bu da pratik olarak kökenlerinin analizine ilişkin verilerden kaynaklanmaktadır (Kuş gribi, 2005). Pandemik influenza virüsleri için kalıcı bir gen kaynağı, su kuşları ve göçmen kuşların virüslerinin doğal rezervuarında (fenotipik olarak değişmemiş bir durumda) mevcuttur (R.G. Welster, 1998). İspanyol gribi salgınına (1918) neden olan virüslerin öncüllerinin yanı sıra Asya/57 ve Hong Kong/68 pandemik suşlarının genomunun kaynağı olan virüslerin hala dolaşımda olduğu akılda tutulmalıdır. küçük mutasyon değişiklikleri gösteren yabani kuş popülasyonu (Grip kuşları..., 2005).
Yorumlar
(yalnızca MEDI RU editör ekibi tarafından doğrulanan uzmanlar görebilir)
Gribin ilk sözü yüzyıllar önce kaydedildi - MÖ 412'de.
reklam Grip benzeri hastalığın tanımını Hipokrat yaptı. Ayrıca
1173'te grip benzeri salgınlar kaydedildi. İlk belgelenen
birçok kişinin ölümüne neden olan bir grip salgını
hayatlar, 1580'de oldu.
1889-1891'de H3N2 tipi bir virüsün neden olduğu orta derecede bir salgın meydana geldi.
H1N1 virüsünün neden olduğu meşhur "İspanyol Gribi" 1918-1920'de meydana geldi.
Bu bilinen en kötü salgın
20 milyondan fazla can alıyor. "İspanyol gribi"nden
Dünya nüfusunun %20-40'ı ciddi şekilde etkilendi.Ölüm son derece
hızlı. Bir kişi sabahleyin tamamen sağlıklı olabilir ama öğlen hastalanır ve
akşam karanlığında öldü. İlk günlerde ölmeyenler çoğunlukla komplikasyonlardan dolayı ölüyordu.
Zatürre gibi gripten kaynaklanan. "İspanyol gribinin" olağandışı bir özelliği şuydu:
sıklıkla gençleri etkilediğini (genellikle öncelikle grip)
çocuklar ve yaşlılar acı çekiyor).
Hastalığın etken maddesi olan influenza virüsü, 1931 yılında Richard Shope tarafından keşfedilmiştir.
İnfluenza A virüsü ilk olarak İngiliz virolog Smith tarafından tanımlandı.
Andrews ve Laidlaw (Ulusal Tıbbi Araştırma Enstitüsü, Londra), 1933'te
yıl. Üç yıl sonra Francis influenza B virüsünü izole etti.
1940 yılında önemli bir keşif yapıldı; grip virüsü
tavuk embriyoları üzerinde kültürlendi. Bunun sayesinde yeni
Grip virüsünü incelemek için fırsatlar.
İnfluenza C virüsü ilk olarak 1947 yılında Taylor tarafından izole edilmiştir.
1957-1958’de salgın vardı
H2N2 virüsünün neden olduğu "Asya gribi" olarak adlandırıldı. Pandemi
Şubat 1957'de Uzak Doğu'da başladı ve hızla
tüm dünyaya yayıldı. Yalnızca ABD'de bu salgın sırasında insanlar öldü.
70.000'den fazla kişi.
1968-1969'da orta derecede şiddetli bir "Hong Kong gribi" meydana geldi.
H3N2 virüsü. Pandemi 1968'in başlarında Hong Kong'da başladı. En sık
Virüs 65 yaş üstü yaşlıları etkiledi. Toplam sayısı
Bu salgından ölenlerin sayısı 33.800 oldu.
1977-1978'de nispeten hafif bir salgın meydana geldi
"Rus" gribi denir. Bu pandemiye neden olan grip virüsü (H1N1)
50'li yıllarda zaten bir salgına neden olmuştu.
Bu nedenle ilk acı çekenler 1950'den sonra doğanlar oldu.
Grip patojenleri, 3 virüs cinsini içeren ortomiksovirüs ailesine aittir. grip: A, B, C. Grip virüsleri, içinde 2 antijenin bulunduğu bir dış kabuk olan RNA içerir - hemaglütinin ve nöraminidaz, özellikle A tipi virüste özelliklerini değiştirebilen Hemaglutinin ve nöraminidazdaki değişiklikler yeni alt tiplerin ortaya çıkmasına neden olur genellikle daha ciddi ve yaygın hastalıklara neden olan virüstür.
Uluslararası İsimlendirmeye göre virüs suşlarının tanımı şu bilgileri içerir: cins, izolasyon yeri, izolat numarası, izolasyon yılı, hemaglutinin (H) ve nöraminidaz (N) tipi. Örneğin, A/Singapur/l/57/H2N2, 1957'de Singapur'da izole edilen ve H2N2 antijen varyantına sahip olan A cinsi bir virüsü belirtir.
Grip pandemileri A tipi virüslerle ilişkilidir. İnfluenza B virüsleri pandemilere neden olmaz, ancak görülme sıklığının arttığı yerel “dalgalar” bir veya daha fazla ülkeyi etkileyebilir. İnfluenza C virüsleri sporadik hastalık vakalarına neden olur. Grip virüsleri düşük sıcaklıklara ve donmaya karşı dayanıklıdır ancak ısıtıldığında hızla ölürler.
Ortomiksovirüsler - grip virüsleri A, B, C
Yapısal özellikler.
Ortomiksovirüsler zarflı (süperkapsid, "giydirilmiş") virüslerdir, virionların ortalama boyutu 80 ila 120 nm arasındadır. Viryonların şekli küreseldir. Genom, tek sarmallı bölümlenmiş (parçalanmış) negatif RNA ile temsil edilir. Virion, zarın üzerinde çıkıntılar (sivri uçlar) - hemaglutinin (HA) ve nöraminidaz (NA) şeklinde çıkıntı yapan iki glikoprotein içeren bir süper kapsid içerir. İnfluenza A virüslerinde antijenik olarak farklı 17 tip hemaglutinin ve 10 tip nöraminidaz bulunur.
İnfluenza virüslerinin sınıflandırılması nükleoprotein antijenleri (A, B ve C virüslerine bölünme) ile yüzey proteinleri HA ve NA arasındaki farklara dayanır. Nükleoprotein (S-antijen olarak da bilinir) yapısı bakımından sabittir ve virüsün tipini (A, B veya C) belirler. Aksine, yüzey antijenleri (hemaglutinin ve nöraminidaz - V-antijenleri) değişkendir ve aynı tip virüsün farklı türlerini belirler. Hemaglutinin ve nöraminidazdaki değişiklikler virüsün yeni alt tiplerinin ortaya çıkmasına neden olur ve bunlar genellikle daha şiddetli ve daha yaygın hastalıklara neden olur.
Hemaglutinin'in ana fonksiyonları:
Hücresel reseptör - mukopeptidi tanır;
Viryonun hücreye nüfuz etmesinden, viryonun zarlarının ve hücrenin füzyonunun sağlanmasından sorumludur; (Hemaglutinin virüsün hücreye tutunma yeteneğini sağlar.)
Antijenleri en büyük koruyucu özelliklere sahiptir. Antijenik özelliklerdeki değişiklikler (antijenik sürüklenme ve kayma), yeni bakterilerin neden olduğu salgın hastalıkların gelişmesine katkıda bulunur. Ag virüsün varyantları (sürü bağışıklığının yeterince gelişmediği).
Nöraminidaz yanıt verir Virionların yayılması için hemaglutinin ile birlikte virüsün epidemik özelliklerini belirler.
Nöraminidaz, ilk olarak bir viral partikülün konakçı hücreye nüfuz etme kabiliyetinden ve ikinci olarak viral partiküllerin üreme sonrasında hücreden çıkma kabiliyetinden sorumludur.
Nükleokapsid, sarmal bir iplik oluşturan 8 vRNA segmentinden ve kapsid proteinlerinden oluşur.
Virüsün yaşam döngüsü.
Ortomiksovirüslerin replikasyonu esas olarak enfekte olmuş hücrenin sitoplazmasında gerçekleştirilir; viral RNA sentezi çekirdekte meydana gelir. Çekirdekte, vRNA üzerinde üç tip virüse özgü RNA sentezlenir: pozitif şablon mRNA'lar (viral proteinlerin sentezi için bir şablon), tam uzunlukta tamamlayıcı cRNA (yeni negatif virion RNA'ların sentezi için bir şablon) ve negatif virion vRNA'lar (yeni sentezlenen viryonların genomu).
Viral proteinler poliribozomlarda sentezlenir. Daha sonra çekirdekteki viral proteinler vRNA'ya bağlanarak bir nükleokapsid oluşturur. Morfogenezin son aşaması M proteini tarafından kontrol edilir. Hücre zarından geçen nükleokapsid önce M proteini, ardından hücresel lipit tabakası ve süperkapsid glikoproteinleri HA ve NA ile kaplanır. Üreme döngüsü 6-8 saat sürer ve yeni sentezlenen virionların tomurcuklanmasıyla sona erer.
Antijenik değişkenlik.
(İnfluenza virüslerinin antijenik değişkenliği. İnfluenza virüsünün değişkenliği iyi bilinmektedir. Antijenik ve biyolojik özelliklerin bu değişkenliği, A ve B tipi influenza virüslerinin temel bir özelliğidir. Virüsün yüzey antijenlerinde - hemaglutinin ve nöraminidazda değişiklikler meydana gelir. Büyük olasılıkla bu, hayatta kalmayı garantileyen evrimsel bir virüs adaptasyon mekanizmasıdır. Yeni virüs türleri, öncekilerden farklı olarak, popülasyonda biriken spesifik antikorlara bağlı değildir. Antijenik değişkenliğin iki mekanizması vardır: nispeten küçük değişiklikler (antijenik sürüklenme) ve güçlü değişiklikler (antijenik değişim).
Ortomiksovirüslerin cinslere (veya A, B ve C tiplerine) modern bölünmesi, ana nükleokapsid proteinlerinin (nükleokapsid proteini - fosfoprotein NP) ve viral zarf matrisinin (M proteini) antijenik özellikleriyle ilişkilidir. NP ve M proteinlerindeki farklılıklara ek olarak ortomiksovirüsler, yüzey proteinleri HA ve NA'nın değişkenliğine bağlı olarak en yüksek antijenik değişkenliğe sahip olmasıyla ayırt edilir. İki ana değişiklik türü vardır: antijenik sürüklenme ve antijenik kayma.
Antijenik sürüklenme bu proteinlerin yapısını değiştiren nokta mutasyonlarından kaynaklanır. İnfluenza sırasındaki salgın sürecinin ana düzenleyicisi popülasyon (toplu) bağışıklığıdır. Oluşumunun bir sonucu olarak, antikorların daha az etkili olduğu değiştirilmiş antijenik yapıya (öncelikle hemaglutinin) sahip suşlar seçilir. Antijenik sürüklenme salgın sürecinin devamlılığını sağlar.
(Antijenik sürüklenme - tüm virüs türlerinde (A, B ve C) pandemiler arasında meydana gelir. Bunlar, onları kodlayan genlerdeki nokta mutasyonların neden olduğu yüzey antijenlerinin (hemaglutinin ve nöraminidaz) yapısında küçük değişikliklerdir. Tipik olarak bu tür değişiklikler Bunun sonucunda virüsle daha önceki temaslardan korunma yetersiz de olsa devam ettiğinden salgın hastalıklar meydana gelir.)
Bununla birlikte, influenza A virüslerinde antijenik değişkenliğin başka bir biçimi keşfedilmiştir: antijenik kayma(kayma) bir tür hemaglutinin (veya nöraminidaz) türünden diğerine geçişle ilişkilidir; virüsün yeni bir antijenik varyantının ortaya çıkması üzerine. Bu nadiren gözlenir ve pandemilerin gelişimi ile ilişkilidir. İnfluenzanın bilinen tüm tarihi boyunca, insanlarda grip salgınlarına neden olan yalnızca birkaç antijenik fenotip tanımlanmıştır: HoN1, H1N1, H2N2, H3N2, yani. yalnızca üç tip hemaglutinin (HA1-3) ve iki nöraminidaz (NA 1 ve 2). İnfluenza virüsleri tip B ve C sadece insanlarda hastalığa neden olurken, influenza A virüsleri insanlarda, memelilerde ve kuşlarda hastalığa neden olur. En değişken influenza A virüsleri en büyük salgın rolüne sahiptir.Influenza C virüsleri nöraminidazdan yoksundur ve bu virüsler genellikle daha hafif bir klinik tabloya neden olur.
Antijenik kaymanın, insan ve hayvan influenza virüsleri arasındaki genetik değişimin (rekombinasyon) sonucu olduğu yönünde bir görüş vardır. Salgınlar arası dönemde, insan popülasyonunun dışında (kuşlarda veya memelilerde) veya insan popülasyonunda (uzun süreli kalıcılık, yerel dolaşım nedeniyle) salgın yeteneklerini geçici olarak tüketen virüslerin nerede olduğu henüz kesin olarak belirlenmemiştir. korunur.
Kuşlar, insanlardan farklı olarak 17 HA tipinin ve 10 NA tipinin tamamını içeren virüslerin yaygın olduğu influenza A virüslerinin birincil ve ana konakçıları olarak kabul edilir. Yaban ördekleri, patojenin gastrointestinal sistemde yer aldığı ve konakçılara gözle görülür bir hasara neden olmadığı influenza A virüslerinin doğal konakçılarıdır. Virüsler diğer kuşlara ve memelilere geçtiklerinde patojenik özelliklerini sergilerler. Memeliler arasında en büyük önem, ara konakçı olarak kabul edilen ve bir "karıştırma kabı" ile karşılaştırılan domuzlara verilmektedir.
(Modern insan influenza virüsleri hayvanlara zayıf bir şekilde bulaşır. 1930'dan bu yana tüm influenza A pandemileri Çin'de başlamıştır, ana yayılma kapısı Sibirya'dır (kuşların toplu göçü).
H1N1- 1930 İnsanlarda, domuzlarda, balinalarda (1972), evcil ve yabani kuşlarda tanımlanmıştır. Ünlü “İspanyol gribi” salgını bununla ilişkilendiriliyor. Bu tür 1977 yılından itibaren yeniden yaygınlaşmıştır.
H2N2 1957'den beri tespit ediliyor. insanlarda ve kuşlarda. Bu virüslerle ilişkili salgınlar periyodik olarak geldi. Artık her iki tür de paralel olarak tanımlanıyor.
H3N2 1963'te tanımlandı. (Hong Kong).
A/Singapur/1/57 (H2N2) virüsü Avrasya kuş gribi virüslerinden üç gene sahiptir; A/Hong Kong/1/68 (H3N2) virüsü "Singapur" virüsünden 6 ve kuşlardan iki gen içerir. Bu veriler, insanlığın yeni salgın tipteki influenza A virüslerini birincil konakçı olan kuşlardan aldığını doğrulamaktadır. Acil tahmin, influenza A virüsünün hemaglutinin HA5 veya 7'ye sahip yeni salgın varyantlarının ortaya çıkma olasılığıdır (yapılarında bir veya iki amino asidin değiştirilmesi yeterlidir).
Ortomiksovirüs ailesi (Yunanca ortos - doğru, tukha - mukus), paramiksovirüsler gibi müsin için afiniteye sahip olan A, B, C tipi influenza virüslerini içerir. İnfluenza A virüsleri insanları ve bazı hayvan türlerini (at, domuz vb.) ve kuşları enfekte eder. B ve C tipi grip virüsleri yalnızca insanlar için patojendir. İlk insan grip virüsü, 1933 yılında W. Smith, C. Andrews ve P. Ladow (WS suşu) tarafından beyaz gelincikleri enfekte ederek insanlardan izole edildi. Daha sonra bu virüs tip A olarak sınıflandırıldı. 1940 yılında T. Francis ve T. Megill influenza virüsünün tip B'sini, 1949'da R. Taylor ise influenza virüsünün tip C'sini keşfetti. İnfluenza virüslerini sınıflandırırken her zaman bazı zorluklar yaşanmıştır. antijenik değişkenlikleriyle ilişkili olarak karşılaşılmıştır. Grip virüsleri A, B ve C olmak üzere üç tipe ayrılır. Tip A, antijenleri - hemaglutinin ve nöraminidaz - bakımından birbirinden farklı olan birkaç alt tip içerir. WHO sınıflandırmasına (1980) göre, insan ve hayvan influenza virüsleri tip A, hemaglutinin (H1-H13) bazlı 13 ve nöraminidaz (N1-N10) bazlı 10 antijenik alt tipe ayrılır. Bunlardan A tipi insan influenza virüsleri üç hemaglutinin (HI, H2 ve NZ) ve iki nöraminidaz (N1 ve N2) içerir.A tipi virüs için hemaglutinin ve nöraminidazın alt tipi parantez içinde belirtilmiştir. Örneğin influenza A virüsü: Khabarovsk/90/77 (H1N1).
